荧光实时定量PCR定量水体中日本血吸虫尾蚴方法的建立
형광실시정량PCR정량수체중일본혈흡충미유방법적건립
Fluorescent quantitative real-time PCR for quantitative detection of Schistosoma japonicum cercariae in water
  • 万方数据
    中国人兽共患病学报 중국인수공환병학보
    CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
    2011年 12期 1075-1081 ,共7页

    王本敬%王文波%周霞%陈艳勤%张静%刘晨晨%梁幼生%诸葛洪祥

    왕본경%왕문파%주하%진염근%장정%류신신%량유생%제갈홍상

    日本血吸虫%尾蚴%荧光实时定量PCR%预警 日本血吸蟲%尾蚴%熒光實時定量PCR%預警
    일본혈흡충%미유%형광실시정량PCR%예경
    目的 建立快速、高效、特异的定量水体中尾蚴的数量和检测水体中日本血吸虫尾蚴残余基因组DNA的方法,来评估水体受日本血吸虫尾蚴污染的程度.方法 根据日本血吸虫基因组DNA中的3个多拷贝序列Sjrh1.0(序列号:U92488.1)、18S小亚基单位核楷体核酸基因(18SrRNA)序列(序列号:AY157226.1)和逆转录转座子SjR2的G55A序列(G55A)(序列号:AF412221.1),设计常规PCR引物和实时定量PCR引物,选取较好的靶序列建立SYBR GreenI实时定量PCR方法,绘制尾蚴数的对数与Ct值的标准曲线,并对疫水中日本血吸虫尾蚴残余的基因组DNA进行检测.结果 尾蚴数的对数与Ct值的标准曲线有良好的线性关系,相关系数r2为0.918 6,重复性良好.结论 本方法特异性高,灵敏,可定量水体中尾蚴数,对疫水检测有一定的预警作用.
    목적 건립쾌속、고효、특이적정량수체중미유적수량화검측수체중일본혈흡충미유잔여기인조DNA적방법,래평고수체수일본혈흡충미유오염적정도.방법 근거일본혈흡충기인조DNA중적3개다고패서렬Sjrh1.0(서렬호:U92488.1)、18S소아기단위핵해체핵산기인(18SrRNA)서렬(서렬호:AY157226.1)화역전록전좌자SjR2적G55A서렬(G55A)(서렬호:AF412221.1),설계상규PCR인물화실시정량PCR인물,선취교호적파서렬건립SYBR GreenI실시정량PCR방법,회제미유수적대수여Ct치적표준곡선,병대역수중일본혈흡충미유잔여적기인조DNA진행검측.결과 미유수적대수여Ct치적표준곡선유량호적선성관계,상관계수r2위0.918 6,중복성량호.결론 본방법특이성고,령민,가정량수체중미유수,대역수검측유일정적예경작용.
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