CAJ | 학술논문

将制备并提纯的抗Xcc单克隆抗体、多克隆抗体及重组抗体,采用间接ELISA方法对比其效价和特异性,筛选用于胶体金速测卡的最优抗体；采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记抗Xcc单抗Xcc-2D8,固定于金标垫上；利用双抗夹心原理,将单抗Xcc-2D6和羊抗鼠抗体分别固定于硝酸纤维素膜上,作为检测线(T线)和质控线 (C线),经试验条件优化,组装胶体金速测卡密封干燥保存.对Xcc菌悬液及柑橘样本浸泡液进行检查.结果表明ELISA方法筛选出2株特异性强、稳定性好的抗体(Xcc-2D8效价为1∶128 000倍、Xcc-2D6效价为1∶256 000倍),应用于胶体金速测卡的研发；所研制速测卡对Xcc菌悬液的最低检测下限为1×103～1×104 cfu/mL,对多个地区的206份柑橘样本进行实际检测所得结果与qPCR方法所得结果具有较高一致性(kappa值=95.15％),混杂的柑橘组织液对检测结果无影响,检测时间控制在10 min以内,检测常见细菌及植物病菌显示特异性良好,各批次速测卡无批间差异,速测卡保存方便稳定性良好.
장제비병제순적항Xcc단극륭항체、다극륭항체급중조항체,채용간접ELISA방법대비기효개화특이성,사선용우효체금속측잡적최우항체；채용저몽산삼납환원법제비효체금과립,표기항Xcc단항Xcc-2D8,고정우금표점상；이용쌍항협심원리,장단항Xcc-2D6화양항서항체분별고정우초산섬유소막상,작위검측선(T선)화질공선 (C선),경시험조건우화,조장효체금속측잡밀봉간조보존.대Xcc균현액급감귤양본침포액진행검사.결과표명ELISA방법사선출2주특이성강、은정성호적항체(Xcc-2D8효개위1∶128 000배、Xcc-2D6효개위1∶256 000배),응용우효체금속측잡적연발；소연제속측잡대Xcc균현액적최저검측하한위1×103～1×104 cfu/mL,대다개지구적206빈감귤양본진행실제검측소득결과여qPCR방법소득결과구유교고일치성(kappa치=95.15％),혼잡적감귤조직액대검측결과무영향,검측시간공제재10 min이내,검측상견세균급식물병균현시특이성량호,각비차속측잡무비간차이,속측잡보존방편은정성량호.