中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2012年
9期
894-897
,共4页
翁育伟%张志珊%林梅清%王金章%黄萌%郑奎城%严延生
翁育偉%張誌珊%林梅清%王金章%黃萌%鄭奎城%嚴延生
옹육위%장지산%림매청%왕금장%황맹%정규성%엄연생
登革病毒%外膜蛋白%重组抗原%表达
登革病毒%外膜蛋白%重組抗原%錶達
등혁병독%외막단백%중조항원%표체
目的 在大肠杆菌中表达重组1-4型登革病毒外膜蛋白,为研制登革病毒抗体快速检测试剂提供原材料.方法 根据基因序列设计、合成引物并经PCR方法扩增1-4型登革病毒部分外膜蛋白基因片段,克隆至表达载体pET30a(+)并在大肠杆菌中诱导表达.小量表达以及纯化后的重组蛋白做SDS-PAGE分析并经WB实验验证其免疫活性.结果 酶切消化及电泳结果表明4种重组质粒均构建成功.经IPTG诱导后,4种重组大肠杆菌均可表达相应的重组蛋白.纯化前后的重组蛋白经WB实验表明,4种重组蛋白均能与对应型别的病毒感染者血清反应.结论 利用大肠杆菌表达系统,成功表达重组1-4型登革病毒外膜蛋白,4种型别的重组蛋白可被各自血清型的抗体结合,均具有免疫反应活性.
目的 在大腸桿菌中錶達重組1-4型登革病毒外膜蛋白,為研製登革病毒抗體快速檢測試劑提供原材料.方法 根據基因序列設計、閤成引物併經PCR方法擴增1-4型登革病毒部分外膜蛋白基因片段,剋隆至錶達載體pET30a(+)併在大腸桿菌中誘導錶達.小量錶達以及純化後的重組蛋白做SDS-PAGE分析併經WB實驗驗證其免疫活性.結果 酶切消化及電泳結果錶明4種重組質粒均構建成功.經IPTG誘導後,4種重組大腸桿菌均可錶達相應的重組蛋白.純化前後的重組蛋白經WB實驗錶明,4種重組蛋白均能與對應型彆的病毒感染者血清反應.結論 利用大腸桿菌錶達繫統,成功錶達重組1-4型登革病毒外膜蛋白,4種型彆的重組蛋白可被各自血清型的抗體結閤,均具有免疫反應活性.
목적 재대장간균중표체중조1-4형등혁병독외막단백,위연제등혁병독항체쾌속검측시제제공원재료.방법 근거기인서렬설계、합성인물병경PCR방법확증1-4형등혁병독부분외막단백기인편단,극륭지표체재체pET30a(+)병재대장간균중유도표체.소량표체이급순화후적중조단백주SDS-PAGE분석병경WB실험험증기면역활성.결과 매절소화급전영결과표명4충중조질립균구건성공.경IPTG유도후,4충중조대장간균균가표체상응적중조단백.순화전후적중조단백경WB실험표명,4충중조단백균능여대응형별적병독감염자혈청반응.결론 이용대장간균표체계통,성공표체중조1-4형등혁병독외막단백,4충형별적중조단백가피각자혈청형적항체결합,균구유면역반응활성.
