北京大学学报(医学版)
北京大學學報(醫學版)
북경대학학보(의학판)
JOURNAL OF PEAKING UNIVERSITY(HEALTH SCIENCES)
2003年
4期
348-352
,共5页
肝肿瘤%基因%转染%细胞增殖
肝腫瘤%基因%轉染%細胞增殖
간종류%기인%전염%세포증식
目的:研究在肝细胞癌中高表达的新基因LAPTM4B 对小鼠NIH3T3细胞生物学行为的影响,探讨LAPTM4B基因的生物学功能.方法:构建真核表达质粒pcDNA3-TM4B,利用脂质体稳定转染LAPTM4B cDNA至NIH3T3细胞中,用RT-PCR、Northern和Western杂交法筛选和鉴定转染后LAPTM4B 基因高表达的单克隆细胞株,研究其与细胞增殖相关的生物学特征的变化.结果:与转染空载体的对照组相比,转染了LAPTM4BcDNA的NIH3T3细胞表面发生明显变化,微绒毛的数量和长度增加,多分枝且缠绕成团.转染细胞在纤黏连蛋白、人工基膜和层黏连蛋白基质上的黏附/铺展能力增强.生长曲线显示转染细胞的生长速率增高.流式细胞仪检测显示转染细胞的S期细胞数比未转染细胞显著增多,而G0～G1期细胞数减少.Western杂交显示Cyclin E蛋白在转染细胞中的表达显著增加.转染细胞对血清的依赖性下降并具有成瘤性.结论:LAPTM4B基因能影响细胞增殖的调节,促进NIH3T3细胞的增殖,并使NIH3T3细胞具有成瘤性,在肿瘤发生过程中具有重要的作用.
目的:研究在肝細胞癌中高錶達的新基因LAPTM4B 對小鼠NIH3T3細胞生物學行為的影響,探討LAPTM4B基因的生物學功能.方法:構建真覈錶達質粒pcDNA3-TM4B,利用脂質體穩定轉染LAPTM4B cDNA至NIH3T3細胞中,用RT-PCR、Northern和Western雜交法篩選和鑒定轉染後LAPTM4B 基因高錶達的單剋隆細胞株,研究其與細胞增殖相關的生物學特徵的變化.結果:與轉染空載體的對照組相比,轉染瞭LAPTM4BcDNA的NIH3T3細胞錶麵髮生明顯變化,微絨毛的數量和長度增加,多分枝且纏繞成糰.轉染細胞在纖黏連蛋白、人工基膜和層黏連蛋白基質上的黏附/鋪展能力增彊.生長麯線顯示轉染細胞的生長速率增高.流式細胞儀檢測顯示轉染細胞的S期細胞數比未轉染細胞顯著增多,而G0～G1期細胞數減少.Western雜交顯示Cyclin E蛋白在轉染細胞中的錶達顯著增加.轉染細胞對血清的依賴性下降併具有成瘤性.結論:LAPTM4B基因能影響細胞增殖的調節,促進NIH3T3細胞的增殖,併使NIH3T3細胞具有成瘤性,在腫瘤髮生過程中具有重要的作用.
목적:연구재간세포암중고표체적신기인LAPTM4B 대소서NIH3T3세포생물학행위적영향,탐토LAPTM4B기인적생물학공능.방법:구건진핵표체질립pcDNA3-TM4B,이용지질체은정전염LAPTM4B cDNA지NIH3T3세포중,용RT-PCR、Northern화Western잡교법사선화감정전염후LAPTM4B 기인고표체적단극륭세포주,연구기여세포증식상관적생물학특정적변화.결과:여전염공재체적대조조상비,전염료LAPTM4BcDNA적NIH3T3세포표면발생명현변화,미융모적수량화장도증가,다분지차전요성단.전염세포재섬점련단백、인공기막화층점련단백기질상적점부/포전능력증강.생장곡선현시전염세포적생장속솔증고.류식세포의검측현시전염세포적S기세포수비미전염세포현저증다,이G0～G1기세포수감소.Western잡교현시Cyclin E단백재전염세포중적표체현저증가.전염세포대혈청적의뢰성하강병구유성류성.결론:LAPTM4B기인능영향세포증식적조절,촉진NIH3T3세포적증식,병사NIH3T3세포구유성류성,재종류발생과정중구유중요적작용.
