现代医学
現代醫學
현대의학
MODERN MEDICAL JOURNAL
2004年
5期
283-286
,共4页
糖基化终产物%一氧化氮合酶%内皮细胞
糖基化終產物%一氧化氮閤酶%內皮細胞
당기화종산물%일양화담합매%내피세포
目的研究糖基化终产物(AGEs)对内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的活性及蛋白表达的影响.方法用糖孵育法制备糖基化修饰的牛血清白蛋白(AGE BSA),用胶原酶法分离培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs).将内皮细胞与不同浓度的AGE BSA在体外分别培养3, 6, 12, 24, 48 h,用同位素二步色谱法检测基础状态下与组胺刺激后的eNOS活性,用蛋白免疫印迹法(Western-blotting)检测eNOS蛋白表达水平.结果基础状态下,HUVECs的eNOS有部分激活,组胺刺激后eNOS活性明显增加(P<0.001). AGE BSA明显抑制基础状态下的eNOS活性和组胺刺激后的eNOS活性增高(P<0.001),这种抑制作用呈时间、浓度依赖性.AGE BSA与HUVECs共同孵育24 h后的eNOS表达水平明显降低(P<0.001),且随着孵育时间的延长,eNOS表达水平进一步降低(P<0.05, 48 h vs 24 h),这种抑制作用与AGE BSA的浓度有关.结论 AGE BSA明显抑制eNOS基础状态和组胺刺激后的活性增高,AGE BSA明显抑制HUVECs的eNOS表达, AGE BSA对eNOS活性的抑制作用可能与降低eNOS表达有关.
目的研究糖基化終產物(AGEs)對內皮型一氧化氮閤酶(eNOS)的活性及蛋白錶達的影響.方法用糖孵育法製備糖基化脩飾的牛血清白蛋白(AGE BSA),用膠原酶法分離培養人臍靜脈內皮細胞(HUVECs).將內皮細胞與不同濃度的AGE BSA在體外分彆培養3, 6, 12, 24, 48 h,用同位素二步色譜法檢測基礎狀態下與組胺刺激後的eNOS活性,用蛋白免疫印跡法(Western-blotting)檢測eNOS蛋白錶達水平.結果基礎狀態下,HUVECs的eNOS有部分激活,組胺刺激後eNOS活性明顯增加(P<0.001). AGE BSA明顯抑製基礎狀態下的eNOS活性和組胺刺激後的eNOS活性增高(P<0.001),這種抑製作用呈時間、濃度依賴性.AGE BSA與HUVECs共同孵育24 h後的eNOS錶達水平明顯降低(P<0.001),且隨著孵育時間的延長,eNOS錶達水平進一步降低(P<0.05, 48 h vs 24 h),這種抑製作用與AGE BSA的濃度有關.結論 AGE BSA明顯抑製eNOS基礎狀態和組胺刺激後的活性增高,AGE BSA明顯抑製HUVECs的eNOS錶達, AGE BSA對eNOS活性的抑製作用可能與降低eNOS錶達有關.
목적연구당기화종산물(AGEs)대내피형일양화담합매(eNOS)적활성급단백표체적영향.방법용당부육법제비당기화수식적우혈청백단백(AGE BSA),용효원매법분리배양인제정맥내피세포(HUVECs).장내피세포여불동농도적AGE BSA재체외분별배양3, 6, 12, 24, 48 h,용동위소이보색보법검측기출상태하여조알자격후적eNOS활성,용단백면역인적법(Western-blotting)검측eNOS단백표체수평.결과기출상태하,HUVECs적eNOS유부분격활,조알자격후eNOS활성명현증가(P<0.001). AGE BSA명현억제기출상태하적eNOS활성화조알자격후적eNOS활성증고(P<0.001),저충억제작용정시간、농도의뢰성.AGE BSA여HUVECs공동부육24 h후적eNOS표체수평명현강저(P<0.001),차수착부육시간적연장,eNOS표체수평진일보강저(P<0.05, 48 h vs 24 h),저충억제작용여AGE BSA적농도유관.결론 AGE BSA명현억제eNOS기출상태화조알자격후적활성증고,AGE BSA명현억제HUVECs적eNOS표체, AGE BSA대eNOS활성적억제작용가능여강저eNOS표체유관.
