中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2008年
5期
861-867
,共7页
宫玉波%陆晓和%周瑾%袁伟%柯晓云%崔国华
宮玉波%陸曉和%週瑾%袁偉%柯曉雲%崔國華
궁옥파%륙효화%주근%원위%가효운%최국화
角膜移植%干扰素类%白细胞介素4%受体%白细胞介素2%移植免疫
角膜移植%榦擾素類%白細胞介素4%受體%白細胞介素2%移植免疫
각막이식%간우소류%백세포개소4%수체%백세포개소2%이식면역
目的:角膜移植免疫排斥反应是一个多因素参与的调节过程,近年来研究表明细胞因子在角膜移植免疫中起重要作用.实验拟验证γ-干扰素、白细胞介素4及CD25在大鼠角膜移植免疫排斥反应中的作用.方法:①实验于2006-10/2007-05在南方医科大学南方医院实验动物中心完成.选用Wistar大鼠24只,SD大鼠54只,实验方法符合动物伦理学要求.②将54只SD大鼠按随机数字表法分为3组,正常组6只,角膜移植组及地塞米松组均24只.后两组制备Wistar→SD角膜移植大鼠模型,受体选择右眼手术,供体提供双眼角膜.③用裂隙灯观察移植排斥情况;利用反转录-聚合酶链反应检测植片内γ-干扰素、CD25 mRNA的表达;应用酶联免疫吸附实验检测房水和血清中γ-干扰素、白细胞介素4含量;应用流式细胞术检测移植前后不同时相外周血淋巴细胞CD25的表达;术后第11天,应用免疫组织化学方法检测角膜CD4+,CD8+和CD25+ T细胞的表达.结果:54只SD大鼠全部进入结果分析.①地塞米松组大鼠发生角膜移植排斥反应的时间长于角膜移植组(P=0.000).②正常角膜植片无CD25、γ-干扰素mRNA表达,角膜移植组术后第11天角膜植片内γ-干扰素、CD25 mRNA的表达较地塞米松组增强(P < 0.05).③角膜移植组角膜移植术后6,11 d血清γ-干扰素含量高于正常组(P < 0.05);术后11 d含量高于术后6,24 d(P < 0.01);地塞米松组术后6,11 d低于同期角膜移植组(P < 0.05).④角膜移植组角膜移植术后6,11,24 d房水γ-干扰素、白细胞介素4含量均高于正常组(P < 0.05);地塞米松组术后6,11 d均低于同期角膜移植组(P < 0.05～0.01).⑤地塞米松组术后6,11 d外周血CD3+CD25+T/CD3+T比值低于同期角膜移植组(P < 0.05).⑥术后第11天角膜移植组植片内CD4,CD8及CD25明显表达,地塞米松组CD4,CD8及CD25表达明显减弱.结论:CD25、γ-干扰素和白细胞介素4在角膜移植免疫排斥反应过程中发挥重要的作用;促进白细胞介素4表达,抑制γ-干扰素及CD25产生,对降低角膜移植免疫排斥反应具有积极的作用.术后动态检测外周血CD25和γ-干扰素的表达有助于临床了解局部免疫反应程度并预测角膜移植排斥反应的发生.
目的:角膜移植免疫排斥反應是一箇多因素參與的調節過程,近年來研究錶明細胞因子在角膜移植免疫中起重要作用.實驗擬驗證γ-榦擾素、白細胞介素4及CD25在大鼠角膜移植免疫排斥反應中的作用.方法:①實驗于2006-10/2007-05在南方醫科大學南方醫院實驗動物中心完成.選用Wistar大鼠24隻,SD大鼠54隻,實驗方法符閤動物倫理學要求.②將54隻SD大鼠按隨機數字錶法分為3組,正常組6隻,角膜移植組及地塞米鬆組均24隻.後兩組製備Wistar→SD角膜移植大鼠模型,受體選擇右眼手術,供體提供雙眼角膜.③用裂隙燈觀察移植排斥情況;利用反轉錄-聚閤酶鏈反應檢測植片內γ-榦擾素、CD25 mRNA的錶達;應用酶聯免疫吸附實驗檢測房水和血清中γ-榦擾素、白細胞介素4含量;應用流式細胞術檢測移植前後不同時相外週血淋巴細胞CD25的錶達;術後第11天,應用免疫組織化學方法檢測角膜CD4+,CD8+和CD25+ T細胞的錶達.結果:54隻SD大鼠全部進入結果分析.①地塞米鬆組大鼠髮生角膜移植排斥反應的時間長于角膜移植組(P=0.000).②正常角膜植片無CD25、γ-榦擾素mRNA錶達,角膜移植組術後第11天角膜植片內γ-榦擾素、CD25 mRNA的錶達較地塞米鬆組增彊(P < 0.05).③角膜移植組角膜移植術後6,11 d血清γ-榦擾素含量高于正常組(P < 0.05);術後11 d含量高于術後6,24 d(P < 0.01);地塞米鬆組術後6,11 d低于同期角膜移植組(P < 0.05).④角膜移植組角膜移植術後6,11,24 d房水γ-榦擾素、白細胞介素4含量均高于正常組(P < 0.05);地塞米鬆組術後6,11 d均低于同期角膜移植組(P < 0.05～0.01).⑤地塞米鬆組術後6,11 d外週血CD3+CD25+T/CD3+T比值低于同期角膜移植組(P < 0.05).⑥術後第11天角膜移植組植片內CD4,CD8及CD25明顯錶達,地塞米鬆組CD4,CD8及CD25錶達明顯減弱.結論:CD25、γ-榦擾素和白細胞介素4在角膜移植免疫排斥反應過程中髮揮重要的作用;促進白細胞介素4錶達,抑製γ-榦擾素及CD25產生,對降低角膜移植免疫排斥反應具有積極的作用.術後動態檢測外週血CD25和γ-榦擾素的錶達有助于臨床瞭解跼部免疫反應程度併預測角膜移植排斥反應的髮生.
목적:각막이식면역배척반응시일개다인소삼여적조절과정,근년래연구표명세포인자재각막이식면역중기중요작용.실험의험증γ-간우소、백세포개소4급CD25재대서각막이식면역배척반응중적작용.방법:①실험우2006-10/2007-05재남방의과대학남방의원실험동물중심완성.선용Wistar대서24지,SD대서54지,실험방법부합동물윤리학요구.②장54지SD대서안수궤수자표법분위3조,정상조6지,각막이식조급지새미송조균24지.후량조제비Wistar→SD각막이식대서모형,수체선택우안수술,공체제공쌍안각막.③용렬극등관찰이식배척정황;이용반전록-취합매련반응검측식편내γ-간우소、CD25 mRNA적표체;응용매련면역흡부실험검측방수화혈청중γ-간우소、백세포개소4함량;응용류식세포술검측이식전후불동시상외주혈림파세포CD25적표체;술후제11천,응용면역조직화학방법검측각막CD4+,CD8+화CD25+ T세포적표체.결과:54지SD대서전부진입결과분석.①지새미송조대서발생각막이식배척반응적시간장우각막이식조(P=0.000).②정상각막식편무CD25、γ-간우소mRNA표체,각막이식조술후제11천각막식편내γ-간우소、CD25 mRNA적표체교지새미송조증강(P < 0.05).③각막이식조각막이식술후6,11 d혈청γ-간우소함량고우정상조(P < 0.05);술후11 d함량고우술후6,24 d(P < 0.01);지새미송조술후6,11 d저우동기각막이식조(P < 0.05).④각막이식조각막이식술후6,11,24 d방수γ-간우소、백세포개소4함량균고우정상조(P < 0.05);지새미송조술후6,11 d균저우동기각막이식조(P < 0.05～0.01).⑤지새미송조술후6,11 d외주혈CD3+CD25+T/CD3+T비치저우동기각막이식조(P < 0.05).⑥술후제11천각막이식조식편내CD4,CD8급CD25명현표체,지새미송조CD4,CD8급CD25표체명현감약.결론:CD25、γ-간우소화백세포개소4재각막이식면역배척반응과정중발휘중요적작용;촉진백세포개소4표체,억제γ-간우소급CD25산생,대강저각막이식면역배척반응구유적겁적작용.술후동태검측외주혈CD25화γ-간우소적표체유조우림상료해국부면역반응정도병예측각막이식배척반응적발생.
