南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2008年
6期
972-975
,共4页
王玉筵%周忠江%张翔%吴赛珠
王玉筵%週忠江%張翔%吳賽珠
왕옥연%주충강%장상%오새주
白蛋白微泡%超声处理%基因转染%细胞骨架%内皮细胞
白蛋白微泡%超聲處理%基因轉染%細胞骨架%內皮細胞
백단백미포%초성처리%기인전염%세포골가%내피세포
目的 探讨白蛋白微泡在治疗性超声条件下对介导基因转染以及对细胞骨架的影响,同时探讨超声联合微泡介导基因转染的最佳声学参数.方法 六孔板培养大鼠微血管内皮细胞,一组每孔加入eGFP质粒10μg,加或不加微泡,超声条件为连续波,频率2 MHz,机械指数是0.50~1.80.照射时间是30~180 S,24~48 h后观察细胞转染情况.一组超声照射后免疫荧光染色细胞骨架,荧光显微镜观察并测定荧光强度.结果 机械指数为0.50~1.00范围内,基因转染率与机械指数呈正相关(P<0.001),再增加机械指数基因转染率差别无统计学意义.超声照射时间30~90 S范围内,基因转染率以及微管荧光强度改变与超声照射时间呈正相关(P<0.001).再延长照射时间基因转染率差别无统计学意义.同种条件下,微丝蛋白荧光强度改变无统计学意义(P>0.05).结论 超声联合微泡能够显著增加报告基因的转染率并且对细胞骨架无明显的损伤.微泡可以作为临床冠心病基因治疗的安全有效的载体.
目的 探討白蛋白微泡在治療性超聲條件下對介導基因轉染以及對細胞骨架的影響,同時探討超聲聯閤微泡介導基因轉染的最佳聲學參數.方法 六孔闆培養大鼠微血管內皮細胞,一組每孔加入eGFP質粒10μg,加或不加微泡,超聲條件為連續波,頻率2 MHz,機械指數是0.50~1.80.照射時間是30~180 S,24~48 h後觀察細胞轉染情況.一組超聲照射後免疫熒光染色細胞骨架,熒光顯微鏡觀察併測定熒光彊度.結果 機械指數為0.50~1.00範圍內,基因轉染率與機械指數呈正相關(P<0.001),再增加機械指數基因轉染率差彆無統計學意義.超聲照射時間30~90 S範圍內,基因轉染率以及微管熒光彊度改變與超聲照射時間呈正相關(P<0.001).再延長照射時間基因轉染率差彆無統計學意義.同種條件下,微絲蛋白熒光彊度改變無統計學意義(P>0.05).結論 超聲聯閤微泡能夠顯著增加報告基因的轉染率併且對細胞骨架無明顯的損傷.微泡可以作為臨床冠心病基因治療的安全有效的載體.
목적 탐토백단백미포재치료성초성조건하대개도기인전염이급대세포골가적영향,동시탐토초성연합미포개도기인전염적최가성학삼수.방법 륙공판배양대서미혈관내피세포,일조매공가입eGFP질립10μg,가혹불가미포,초성조건위련속파,빈솔2 MHz,궤계지수시0.50~1.80.조사시간시30~180 S,24~48 h후관찰세포전염정황.일조초성조사후면역형광염색세포골가,형광현미경관찰병측정형광강도.결과 궤계지수위0.50~1.00범위내,기인전염솔여궤계지수정정상관(P<0.001),재증가궤계지수기인전염솔차별무통계학의의.초성조사시간30~90 S범위내,기인전염솔이급미관형광강도개변여초성조사시간정정상관(P<0.001).재연장조사시간기인전염솔차별무통계학의의.동충조건하,미사단백형광강도개변무통계학의의(P>0.05).결론 초성연합미포능구현저증가보고기인적전염솔병차대세포골가무명현적손상.미포가이작위림상관심병기인치료적안전유효적재체.