应用与环境生物学报
應用與環境生物學報
응용여배경생물학보
CHINESE JOURNAL OF APPLIED & ENVIRONMENTAL BIOLOGY
2008年
4期
534-538
,共5页
耐高温α-淀粉酶基因%启动子P43%amy启动子%高效表达
耐高溫α-澱粉酶基因%啟動子P43%amy啟動子%高效錶達
내고온α-정분매기인%계동자P43%amy계동자%고효표체
高温α-淀粉酶是发酵行业用量最大的酶类,为了实现高温α-淀粉酶基因的高效表达,本研究比较了不同启动子对地衣芽孢杆菌的耐高温α-淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌中表达的影响.分别用强启动子P43和地衣芽孢杆菌的耐高温α-淀粉酶基因自身启动子构建了表达载体pP43NMK-amy和pUBCl9-amy,并在枯草芽孢杆菌BacillussubtilislA752S中进行表达.结果表明,与地衣芽孢杆菌的耐高温α-淀粉酶基闪自身启动子相比,采用P43启动子的耐高温α-淀粉酶其表达水平提高了8.9倍.而且在枯草芽孢杆菌B.subtilislA752S中分泌表达的α-淀粉酶仍具有耐高温的特性,酶反应的最适温度为90℃,表明酶的热稳定性南蛋白质本身的氨基酸序列决定的.
高溫α-澱粉酶是髮酵行業用量最大的酶類,為瞭實現高溫α-澱粉酶基因的高效錶達,本研究比較瞭不同啟動子對地衣芽孢桿菌的耐高溫α-澱粉酶基因在枯草芽孢桿菌中錶達的影響.分彆用彊啟動子P43和地衣芽孢桿菌的耐高溫α-澱粉酶基因自身啟動子構建瞭錶達載體pP43NMK-amy和pUBCl9-amy,併在枯草芽孢桿菌BacillussubtilislA752S中進行錶達.結果錶明,與地衣芽孢桿菌的耐高溫α-澱粉酶基閃自身啟動子相比,採用P43啟動子的耐高溫α-澱粉酶其錶達水平提高瞭8.9倍.而且在枯草芽孢桿菌B.subtilislA752S中分泌錶達的α-澱粉酶仍具有耐高溫的特性,酶反應的最適溫度為90℃,錶明酶的熱穩定性南蛋白質本身的氨基痠序列決定的.
고온α-정분매시발효행업용량최대적매류,위료실현고온α-정분매기인적고효표체,본연구비교료불동계동자대지의아포간균적내고온α-정분매기인재고초아포간균중표체적영향.분별용강계동자P43화지의아포간균적내고온α-정분매기인자신계동자구건료표체재체pP43NMK-amy화pUBCl9-amy,병재고초아포간균BacillussubtilislA752S중진행표체.결과표명,여지의아포간균적내고온α-정분매기섬자신계동자상비,채용P43계동자적내고온α-정분매기표체수평제고료8.9배.이차재고초아포간균B.subtilislA752S중분비표체적α-정분매잉구유내고온적특성,매반응적최괄온도위90℃,표명매적열은정성남단백질본신적안기산서렬결정적.