中国药理学与毒理学杂志
中國藥理學與毒理學雜誌
중국약이학여독이학잡지
CHINESE JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND TOXICOLOGY
2008年
5期
375-381
,共7页
沈晓帆%王旗%杨秀伟%江芳
瀋曉帆%王旂%楊秀偉%江芳
침효범%왕기%양수위%강방
七叶皂苷%肾/毒性%HK-2细胞%维生素C%谷胱甘肽
七葉皂苷%腎/毒性%HK-2細胞%維生素C%穀胱甘肽
칠협조감%신/독성%HK-2세포%유생소C%곡광감태
目的 研究七叶皂苷不同组分和七叶皂苷钠注射剂提取物(ESA)的肾毒性及可能的作用机制.方法 以成人肾近曲小管上皮细胞(HK-2)为模型,氯化汞(HgCl2)为阳性对照,研究含七叶皂苷Ia(A)与Ib(B)的提取物(A+B)、含异七叶皂苷Ia(C)与Ib(D)提取物(C+D)、含A+B+C+D及ESA的细胞毒性以及抗氧化剂维生素C(Vit C)和还原型谷胱甘肽(GSH)对ESA毒性的拮抗作用.用MTT法检测细胞存活率;乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测细胞膜损伤;倒置显微镜观察细胞形态学改变;流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡.结果 A+B,C+D、A+B+C+D和ESA分别与HK-2细胞作用24 h, 均显著抑制细胞的存活,并且具有良好的浓度-效应关系,半数抑制浓度(IC50)值分别为: (26.5±1.7),(35.4±2.2),(28.4±1.8)和(23.3±1.7)μmol·L-1.A+B,A+B+C+D (60~100 μmol·L-1), C+D和ESA(40~100 μmol·L-1)分别与HK-2细胞作用24 h, LDH释放率明显升高.80 μmol·L-1 A+B,C+D,A+B+C+D和ESA分别与HK-2细胞作用24 h,相差显微镜下可观察到细胞收缩、变圆.ESA和A+B+C+D均能导致HK-2细胞出现明显的G2/M期阻滞,同时伴有S期细胞减少,并且随着浓度的增加,G2/M期细胞所占的比例逐渐增加.抗氧化剂Vit C不能拮抗HgCl2和ESA引起的细胞损伤作用;GSH对HgCl2 30 μmol·L-1引起的细胞损伤有一定的拮抗作用,GSH对ESA 30及60 μmol·L-1引起的细胞损伤均有一定的拮抗作用,但对ESA 100 μmol·L-1引起的细胞损伤无拮抗作用.结论 七叶皂苷对肾小管上皮细胞具有明显的毒性, 七叶皂苷不同组分之间的毒性存在显著差异.氧化损伤可能是其毒性机制之一.
目的 研究七葉皂苷不同組分和七葉皂苷鈉註射劑提取物(ESA)的腎毒性及可能的作用機製.方法 以成人腎近麯小管上皮細胞(HK-2)為模型,氯化汞(HgCl2)為暘性對照,研究含七葉皂苷Ia(A)與Ib(B)的提取物(A+B)、含異七葉皂苷Ia(C)與Ib(D)提取物(C+D)、含A+B+C+D及ESA的細胞毒性以及抗氧化劑維生素C(Vit C)和還原型穀胱甘肽(GSH)對ESA毒性的拮抗作用.用MTT法檢測細胞存活率;乳痠脫氫酶(LDH)釋放實驗檢測細胞膜損傷;倒置顯微鏡觀察細胞形態學改變;流式細胞儀檢測細胞週期和細胞凋亡.結果 A+B,C+D、A+B+C+D和ESA分彆與HK-2細胞作用24 h, 均顯著抑製細胞的存活,併且具有良好的濃度-效應關繫,半數抑製濃度(IC50)值分彆為: (26.5±1.7),(35.4±2.2),(28.4±1.8)和(23.3±1.7)μmol·L-1.A+B,A+B+C+D (60~100 μmol·L-1), C+D和ESA(40~100 μmol·L-1)分彆與HK-2細胞作用24 h, LDH釋放率明顯升高.80 μmol·L-1 A+B,C+D,A+B+C+D和ESA分彆與HK-2細胞作用24 h,相差顯微鏡下可觀察到細胞收縮、變圓.ESA和A+B+C+D均能導緻HK-2細胞齣現明顯的G2/M期阻滯,同時伴有S期細胞減少,併且隨著濃度的增加,G2/M期細胞所佔的比例逐漸增加.抗氧化劑Vit C不能拮抗HgCl2和ESA引起的細胞損傷作用;GSH對HgCl2 30 μmol·L-1引起的細胞損傷有一定的拮抗作用,GSH對ESA 30及60 μmol·L-1引起的細胞損傷均有一定的拮抗作用,但對ESA 100 μmol·L-1引起的細胞損傷無拮抗作用.結論 七葉皂苷對腎小管上皮細胞具有明顯的毒性, 七葉皂苷不同組分之間的毒性存在顯著差異.氧化損傷可能是其毒性機製之一.
목적 연구칠협조감불동조분화칠협조감납주사제제취물(ESA)적신독성급가능적작용궤제.방법 이성인신근곡소관상피세포(HK-2)위모형,록화홍(HgCl2)위양성대조,연구함칠협조감Ia(A)여Ib(B)적제취물(A+B)、함이칠협조감Ia(C)여Ib(D)제취물(C+D)、함A+B+C+D급ESA적세포독성이급항양화제유생소C(Vit C)화환원형곡광감태(GSH)대ESA독성적길항작용.용MTT법검측세포존활솔;유산탈경매(LDH)석방실험검측세포막손상;도치현미경관찰세포형태학개변;류식세포의검측세포주기화세포조망.결과 A+B,C+D、A+B+C+D화ESA분별여HK-2세포작용24 h, 균현저억제세포적존활,병차구유량호적농도-효응관계,반수억제농도(IC50)치분별위: (26.5±1.7),(35.4±2.2),(28.4±1.8)화(23.3±1.7)μmol·L-1.A+B,A+B+C+D (60~100 μmol·L-1), C+D화ESA(40~100 μmol·L-1)분별여HK-2세포작용24 h, LDH석방솔명현승고.80 μmol·L-1 A+B,C+D,A+B+C+D화ESA분별여HK-2세포작용24 h,상차현미경하가관찰도세포수축、변원.ESA화A+B+C+D균능도치HK-2세포출현명현적G2/M기조체,동시반유S기세포감소,병차수착농도적증가,G2/M기세포소점적비례축점증가.항양화제Vit C불능길항HgCl2화ESA인기적세포손상작용;GSH대HgCl2 30 μmol·L-1인기적세포손상유일정적길항작용,GSH대ESA 30급60 μmol·L-1인기적세포손상균유일정적길항작용,단대ESA 100 μmol·L-1인기적세포손상무길항작용.결론 칠협조감대신소관상피세포구유명현적독성, 칠협조감불동조분지간적독성존재현저차이.양화손상가능시기독성궤제지일.
