中国真菌学杂志
中國真菌學雜誌
중국진균학잡지
CHINESE JOURNAL OF MYCOLOGY
2011年
2期
87-92
,共6页
赵作涛%孙铮%万喆%朱平%李若瑜
趙作濤%孫錚%萬喆%硃平%李若瑜
조작도%손쟁%만철%주평%리약유
烟曲霉%Asp f16%抗原表位%树突状细胞%细胞毒性T细胞
煙麯黴%Asp f16%抗原錶位%樹突狀細胞%細胞毒性T細胞
연곡매%Asp f16%항원표위%수돌상세포%세포독성T세포
目的 预测与鉴定烟曲霉抗原Asp f16的HLA-A *0201限制性CD8+细胞毒性T细胞(CTL)抗原表位.方法 以国人常见的HLA-A*0201位点为靶点,依据生物信息学软件扫描烟曲霉特异性抗原Asp f16的全部427个氨基酸序列.使用HLA-A *0201转基因小鼠制备骨髓来源的树突状细胞(DC)和CTL.流式细胞仪技术检测DC表面MHC Ⅱ类抗原,CD80,CD86和CD11c的表达来验证其是否成熟.ELISPOT试验检测烟曲霉抗原多肽特异性CTL产生的细胞因子IFN-γ.四聚体(Tetramer)试验证实烟曲霉特异性CTL与抗原肽,HLA-A*0201分子复合体的亲和性.结果 根据与MHC I类分子结合的半衰期评分,选择了3个HLA-A*0201限制性抗原表位.流式细胞仪分析示成熟DC高表达HLA Ⅱ类抗原,CD80,CD86和CD11c.Tetramer试验证实烟曲霉特异性T细胞受体与抗原肽,HLA-A*0201分子复合体的高亲和性.ELISPOT实验结果 表明烟曲霉抗原肽体外可以活化CD8+CTL,被负载了抗原肽的DC刺激活化后可以产生IFN-γ.结论 本研究成功鉴定烟曲霉抗原Asp f16的HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位,可作为疫苗设计的候选表位,为进一步研发新型抗烟曲霉疫苗提供参考.
目的 預測與鑒定煙麯黴抗原Asp f16的HLA-A *0201限製性CD8+細胞毒性T細胞(CTL)抗原錶位.方法 以國人常見的HLA-A*0201位點為靶點,依據生物信息學軟件掃描煙麯黴特異性抗原Asp f16的全部427箇氨基痠序列.使用HLA-A *0201轉基因小鼠製備骨髓來源的樹突狀細胞(DC)和CTL.流式細胞儀技術檢測DC錶麵MHC Ⅱ類抗原,CD80,CD86和CD11c的錶達來驗證其是否成熟.ELISPOT試驗檢測煙麯黴抗原多肽特異性CTL產生的細胞因子IFN-γ.四聚體(Tetramer)試驗證實煙麯黴特異性CTL與抗原肽,HLA-A*0201分子複閤體的親和性.結果 根據與MHC I類分子結閤的半衰期評分,選擇瞭3箇HLA-A*0201限製性抗原錶位.流式細胞儀分析示成熟DC高錶達HLA Ⅱ類抗原,CD80,CD86和CD11c.Tetramer試驗證實煙麯黴特異性T細胞受體與抗原肽,HLA-A*0201分子複閤體的高親和性.ELISPOT實驗結果 錶明煙麯黴抗原肽體外可以活化CD8+CTL,被負載瞭抗原肽的DC刺激活化後可以產生IFN-γ.結論 本研究成功鑒定煙麯黴抗原Asp f16的HLA-A*0201限製性CD8+CTL錶位,可作為疫苗設計的候選錶位,為進一步研髮新型抗煙麯黴疫苗提供參攷.
목적 예측여감정연곡매항원Asp f16적HLA-A *0201한제성CD8+세포독성T세포(CTL)항원표위.방법 이국인상견적HLA-A*0201위점위파점,의거생물신식학연건소묘연곡매특이성항원Asp f16적전부427개안기산서렬.사용HLA-A *0201전기인소서제비골수래원적수돌상세포(DC)화CTL.류식세포의기술검측DC표면MHC Ⅱ류항원,CD80,CD86화CD11c적표체래험증기시부성숙.ELISPOT시험검측연곡매항원다태특이성CTL산생적세포인자IFN-γ.사취체(Tetramer)시험증실연곡매특이성CTL여항원태,HLA-A*0201분자복합체적친화성.결과 근거여MHC I류분자결합적반쇠기평분,선택료3개HLA-A*0201한제성항원표위.류식세포의분석시성숙DC고표체HLA Ⅱ류항원,CD80,CD86화CD11c.Tetramer시험증실연곡매특이성T세포수체여항원태,HLA-A*0201분자복합체적고친화성.ELISPOT실험결과 표명연곡매항원태체외가이활화CD8+CTL,피부재료항원태적DC자격활화후가이산생IFN-γ.결론 본연구성공감정연곡매항원Asp f16적HLA-A*0201한제성CD8+CTL표위,가작위역묘설계적후선표위,위진일보연발신형항연곡매역묘제공삼고.
