华中农业大学学报
華中農業大學學報
화중농업대학학보
JOURNAL OF HUAZHONG AGRICULTURAL UNIVERSITY
2011年
6期
667-670
,共4页
杨敏敏%刘红艳%左阳%赵应忠
楊敏敏%劉紅豔%左暘%趙應忠
양민민%류홍염%좌양%조응충
油料作物%芝麻%AFLP%反应体系%优化
油料作物%芝痳%AFLP%反應體繫%優化
유료작물%지마%AFLP%반응체계%우화
以芝麻细胞核雄性不育系95ms-5为材料,对AFLP反应体系中的酶切连接、预扩增和选择性扩增中的关键性因素进行了优化.结果表明,在模板DNA质量浓度为200 ng/ μL、37℃酶切连接6h的情况下,预扩增中最佳Mg2+浓度为1.0 mmol/L,dNTP最佳浓度为0.3 mmol/L,Taq酶量以0.5U为宜,预扩增引物终浓度为0.4 mmol/L;选择性扩增中,预扩增产物稀释10倍后,以Mg2+0.8 mmol/L、dNTP 0.2 mmol/L、Taq酶1.0U、选扩引物0.6 mmol/L为宜.
以芝痳細胞覈雄性不育繫95ms-5為材料,對AFLP反應體繫中的酶切連接、預擴增和選擇性擴增中的關鍵性因素進行瞭優化.結果錶明,在模闆DNA質量濃度為200 ng/ μL、37℃酶切連接6h的情況下,預擴增中最佳Mg2+濃度為1.0 mmol/L,dNTP最佳濃度為0.3 mmol/L,Taq酶量以0.5U為宜,預擴增引物終濃度為0.4 mmol/L;選擇性擴增中,預擴增產物稀釋10倍後,以Mg2+0.8 mmol/L、dNTP 0.2 mmol/L、Taq酶1.0U、選擴引物0.6 mmol/L為宜.
이지마세포핵웅성불육계95ms-5위재료,대AFLP반응체계중적매절련접、예확증화선택성확증중적관건성인소진행료우화.결과표명,재모판DNA질량농도위200 ng/ μL、37℃매절련접6h적정황하,예확증중최가Mg2+농도위1.0 mmol/L,dNTP최가농도위0.3 mmol/L,Taq매량이0.5U위의,예확증인물종농도위0.4 mmol/L;선택성확증중,예확증산물희석10배후,이Mg2+0.8 mmol/L、dNTP 0.2 mmol/L、Taq매1.0U、선확인물0.6 mmol/L위의.
