生命科学研究
生命科學研究
생명과학연구
LIFE SCIENCE RESEARCH
2012年
2期
153-157
,共5页
袁宪宇%刘立鹏%沈运兰%唐建华
袁憲宇%劉立鵬%瀋運蘭%唐建華
원헌우%류립붕%침운란%당건화
糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D%白血病%HL-60细胞%癌胚抗原
糖基化燐脂酰肌醇特異性燐脂酶D%白血病%HL-60細胞%癌胚抗原
당기화린지선기순특이성린지매D%백혈병%HL-60세포%암배항원
糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂醇Dglycosyl phosphatidyl inositol specific phospholipase D,GPI-PLD)是人体内唯一可水解细胞膜表面GPI结构、调节GPI锚定蛋白释放的酶.将GPI-PLD转染入急性粒细胞白血病(AGL)的HL-60细胞株,采用实时荧光定量PCR法和Western blot法确定转染后HL-60细胞内GPI-PLD的表达水平;并检测GPI-PLD活性；噻唑蓝(MTT)检测HL-60细胞的增殖；流式细胞仪检测HL-60细胞的凋亡.ELISA检测GPI锚定癌胚抗原(CEA)的表达和释放情况.转染GPI-PLD后,HL-60细胞株中GPI-PLD表达量与活性增加；MTT检测显示,GPI-PLD过表达后HL-60细胞株增殖生长受到抑制；流式检测证实HL-60细胞凋亡增加；且GPI锚定的蛋白质CEA释放增加.该结果提示GPI-PLD基因有抗肿瘤的作用,过表达GPI-PLD后能抑制HL-60细胞增殖且促进其凋亡,所涉机制可能与GPI-PLD释放GPI锚定蛋白,增强白血病细胞对补体杀伤的敏感性有关.
糖基化燐脂酰肌醇特異性燐脂醇Dglycosyl phosphatidyl inositol specific phospholipase D,GPI-PLD)是人體內唯一可水解細胞膜錶麵GPI結構、調節GPI錨定蛋白釋放的酶.將GPI-PLD轉染入急性粒細胞白血病(AGL)的HL-60細胞株,採用實時熒光定量PCR法和Western blot法確定轉染後HL-60細胞內GPI-PLD的錶達水平;併檢測GPI-PLD活性；噻唑藍(MTT)檢測HL-60細胞的增殖；流式細胞儀檢測HL-60細胞的凋亡.ELISA檢測GPI錨定癌胚抗原(CEA)的錶達和釋放情況.轉染GPI-PLD後,HL-60細胞株中GPI-PLD錶達量與活性增加；MTT檢測顯示,GPI-PLD過錶達後HL-60細胞株增殖生長受到抑製；流式檢測證實HL-60細胞凋亡增加；且GPI錨定的蛋白質CEA釋放增加.該結果提示GPI-PLD基因有抗腫瘤的作用,過錶達GPI-PLD後能抑製HL-60細胞增殖且促進其凋亡,所涉機製可能與GPI-PLD釋放GPI錨定蛋白,增彊白血病細胞對補體殺傷的敏感性有關.
당기화린지선기순특이성린지순Dglycosyl phosphatidyl inositol specific phospholipase D,GPI-PLD)시인체내유일가수해세포막표면GPI결구、조절GPI묘정단백석방적매.장GPI-PLD전염입급성립세포백혈병(AGL)적HL-60세포주,채용실시형광정량PCR법화Western blot법학정전염후HL-60세포내GPI-PLD적표체수평;병검측GPI-PLD활성；새서람(MTT)검측HL-60세포적증식；류식세포의검측HL-60세포적조망.ELISA검측GPI묘정암배항원(CEA)적표체화석방정황.전염GPI-PLD후,HL-60세포주중GPI-PLD표체량여활성증가；MTT검측현시,GPI-PLD과표체후HL-60세포주증식생장수도억제；류식검측증실HL-60세포조망증가；차GPI묘정적단백질CEA석방증가.해결과제시GPI-PLD기인유항종류적작용,과표체GPI-PLD후능억제HL-60세포증식차촉진기조망,소섭궤제가능여GPI-PLD석방GPI묘정단백,증강백혈병세포대보체살상적민감성유관.
