解剖学研究
解剖學研究
해부학연구
ANATOMY RESEARCH
2012年
3期
167-172
,共6页
刘晓畅%刘朝纯%李秀博%朱邦豪
劉曉暢%劉朝純%李秀博%硃邦豪
류효창%류조순%리수박%주방호
灯盏花素%视网膜%发卡RNA%血管内皮生长因子%蛋白激酶C
燈盞花素%視網膜%髮卡RNA%血管內皮生長因子%蛋白激酶C
등잔화소%시망막%발잡RNA%혈관내피생장인자%단백격매C
目的 通过观察1 μmol/L灯盏花素对高糖、低氧,及高糖联合低氧环境下人视网膜色素上皮(RPE)细胞株D407细胞分泌VEGF的影响,PKCδ的转位激活变化,以及构建PKCδ的小分子干扰载体,探讨灯盏花素对RPE细胞在糖尿病环境下分泌VEGF的调节作用及机制.方法 常规培养D407细胞,分为对照组(5.56 mmol/L葡萄糖)、高糖组(25.0mmol/L葡萄糖),低氧组(200.0 μmol/L CoC12),联合组(25.0 mmol/L葡萄糖+200.μmol/L CoCl2),灯盏花素干预联合组(25.0 mmol/L葡萄糖加200 μmol/L CoCl2加灯盏花素1.0μmol/L),ELISA检测VEGF浓度,Western blot检测PKCδ的转位激活水平；构建PKCδ小分子干扰载体转染D407细胞后,Western blot检测PKCδ表达水平,ELISA检测VEGF分泌水平.结果 高糖组、低氧组、联合组分别与对照组比较,细胞分泌VEGF与PKCδ转位激活均增加(均P＜0.05),联合组增加最明显(P＜0.01)；灯盏花素在1 μmol/L的浓度下可以显著降低高糖联合低氧诱导的VEGF分泌；灯盏花素可以抑制高糖联合低氧引起的PKCδ转位激活；所构建的sh3-PKCδ干扰载体可以降低PKCδ表达水平,干扰PKCδ后联合组的VEGF分泌水平降低(P＜0.05).结论 灯盏花素可以抑制高糖联合低氧诱导RPE细胞分泌VEGF,这可能与灯盏花素抑制了PKCδ转位激活有关,提示PKCδ可能是DR的一个药物靶点,灯盏花素具有作为DR治疗药物的前景.
目的 通過觀察1 μmol/L燈盞花素對高糖、低氧,及高糖聯閤低氧環境下人視網膜色素上皮(RPE)細胞株D407細胞分泌VEGF的影響,PKCδ的轉位激活變化,以及構建PKCδ的小分子榦擾載體,探討燈盞花素對RPE細胞在糖尿病環境下分泌VEGF的調節作用及機製.方法 常規培養D407細胞,分為對照組(5.56 mmol/L葡萄糖)、高糖組(25.0mmol/L葡萄糖),低氧組(200.0 μmol/L CoC12),聯閤組(25.0 mmol/L葡萄糖+200.μmol/L CoCl2),燈盞花素榦預聯閤組(25.0 mmol/L葡萄糖加200 μmol/L CoCl2加燈盞花素1.0μmol/L),ELISA檢測VEGF濃度,Western blot檢測PKCδ的轉位激活水平；構建PKCδ小分子榦擾載體轉染D407細胞後,Western blot檢測PKCδ錶達水平,ELISA檢測VEGF分泌水平.結果 高糖組、低氧組、聯閤組分彆與對照組比較,細胞分泌VEGF與PKCδ轉位激活均增加(均P＜0.05),聯閤組增加最明顯(P＜0.01)；燈盞花素在1 μmol/L的濃度下可以顯著降低高糖聯閤低氧誘導的VEGF分泌；燈盞花素可以抑製高糖聯閤低氧引起的PKCδ轉位激活；所構建的sh3-PKCδ榦擾載體可以降低PKCδ錶達水平,榦擾PKCδ後聯閤組的VEGF分泌水平降低(P＜0.05).結論 燈盞花素可以抑製高糖聯閤低氧誘導RPE細胞分泌VEGF,這可能與燈盞花素抑製瞭PKCδ轉位激活有關,提示PKCδ可能是DR的一箇藥物靶點,燈盞花素具有作為DR治療藥物的前景.
목적 통과관찰1 μmol/L등잔화소대고당、저양,급고당연합저양배경하인시망막색소상피(RPE)세포주D407세포분비VEGF적영향,PKCδ적전위격활변화,이급구건PKCδ적소분자간우재체,탐토등잔화소대RPE세포재당뇨병배경하분비VEGF적조절작용급궤제.방법 상규배양D407세포,분위대조조(5.56 mmol/L포도당)、고당조(25.0mmol/L포도당),저양조(200.0 μmol/L CoC12),연합조(25.0 mmol/L포도당+200.μmol/L CoCl2),등잔화소간예연합조(25.0 mmol/L포도당가200 μmol/L CoCl2가등잔화소1.0μmol/L),ELISA검측VEGF농도,Western blot검측PKCδ적전위격활수평；구건PKCδ소분자간우재체전염D407세포후,Western blot검측PKCδ표체수평,ELISA검측VEGF분비수평.결과 고당조、저양조、연합조분별여대조조비교,세포분비VEGF여PKCδ전위격활균증가(균P＜0.05),연합조증가최명현(P＜0.01)；등잔화소재1 μmol/L적농도하가이현저강저고당연합저양유도적VEGF분비；등잔화소가이억제고당연합저양인기적PKCδ전위격활；소구건적sh3-PKCδ간우재체가이강저PKCδ표체수평,간우PKCδ후연합조적VEGF분비수평강저(P＜0.05).결론 등잔화소가이억제고당연합저양유도RPE세포분비VEGF,저가능여등잔화소억제료PKCδ전위격활유관,제시PKCδ가능시DR적일개약물파점,등잔화소구유작위DR치료약물적전경.
