中国优生与遗传杂志
中國優生與遺傳雜誌
중국우생여유전잡지
CHINESE JOURNAL OF BIRTH HEALTH AND HEREDITY
2008年
3期
42-44
,共3页
徐瑛%周常文%林炤华%柯琦
徐瑛%週常文%林炤華%柯琦
서영%주상문%림소화%가기
CaMK Ⅱα基因启动子%克隆%Cre重组酶%表达载体%神经细胞特异性
CaMK Ⅱα基因啟動子%剋隆%Cre重組酶%錶達載體%神經細胞特異性
CaMK Ⅱα기인계동자%극륭%Cre중조매%표체재체%신경세포특이성
目的 克隆和鉴定CaMK Ⅱα基因启动子序列,构建神经细胞特异性Cre重组酶的真核表达载体.方法 采用高保真PCR方法分步扩增CaMK Ⅱα基因5'端8.1kb的调控区DNA片段,该片段包括了CaMK Ⅱα基因5'端调控区的所有序列.经克隆和部分序列测定后,依次与pCre-IRES-EGFP质粒框架连接,构建载体.结果 克隆的CaMK Ⅱα基因5'端侧翼区酶切图谱与公布的C57BL/6J小鼠相应序列的酶切位点相一致,其中文献报道的富含顺式调控元件的序列与公布的小鼠序列完全相同.CaMK Ⅱα基因启动子正确地连接于Cre基因的5'端,构建了目标载体.结论 这一载体的构建为建立前脑神经细胞特异性表达Cre重组酶的转基因小鼠奠定了基础,有助于神经系统相关疾病的研究.
目的 剋隆和鑒定CaMK Ⅱα基因啟動子序列,構建神經細胞特異性Cre重組酶的真覈錶達載體.方法 採用高保真PCR方法分步擴增CaMK Ⅱα基因5'耑8.1kb的調控區DNA片段,該片段包括瞭CaMK Ⅱα基因5'耑調控區的所有序列.經剋隆和部分序列測定後,依次與pCre-IRES-EGFP質粒框架連接,構建載體.結果 剋隆的CaMK Ⅱα基因5'耑側翼區酶切圖譜與公佈的C57BL/6J小鼠相應序列的酶切位點相一緻,其中文獻報道的富含順式調控元件的序列與公佈的小鼠序列完全相同.CaMK Ⅱα基因啟動子正確地連接于Cre基因的5'耑,構建瞭目標載體.結論 這一載體的構建為建立前腦神經細胞特異性錶達Cre重組酶的轉基因小鼠奠定瞭基礎,有助于神經繫統相關疾病的研究.
목적 극륭화감정CaMK Ⅱα기인계동자서렬,구건신경세포특이성Cre중조매적진핵표체재체.방법 채용고보진PCR방법분보확증CaMK Ⅱα기인5'단8.1kb적조공구DNA편단,해편단포괄료CaMK Ⅱα기인5'단조공구적소유서렬.경극륭화부분서렬측정후,의차여pCre-IRES-EGFP질립광가련접,구건재체.결과 극륭적CaMK Ⅱα기인5'단측익구매절도보여공포적C57BL/6J소서상응서렬적매절위점상일치,기중문헌보도적부함순식조공원건적서렬여공포적소서서렬완전상동.CaMK Ⅱα기인계동자정학지련접우Cre기인적5'단,구건료목표재체.결론 저일재체적구건위건립전뇌신경세포특이성표체Cre중조매적전기인소서전정료기출,유조우신경계통상관질병적연구.
