生理学报
生理學報
생이학보
ACTA PHYSIOLOGICA SINICA
2008年
3期
431-436
,共6页
刘正山%张成%卢锡林%李勇%许勇峰%熊符%冯善伟%李玲
劉正山%張成%盧錫林%李勇%許勇峰%熊符%馮善偉%李玲
류정산%장성%로석림%리용%허용봉%웅부%풍선위%리령
骨髓来源间充质干细胞%杆状病毒%转导%绿色荧光蛋白
骨髓來源間充質榦細胞%桿狀病毒%轉導%綠色熒光蛋白
골수래원간충질간세포%간상병독%전도%록색형광단백
杆状病毒作为一种新型基因载体,若能有效转导不同哺乳动物骨髓来源间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells, BMSCs),将会成为干细胞基因修饰研究领域中更理想的一种基因载体.本文探讨了重组杆状病毒(BacV-CMV-EGFP)对不同哺乳动物BMSCs的转导效率.体外原代培养小鼠、大鼠、猪、恒河猴及人的BMSCs.用培养3代以上的哺乳动物BMSCs进行病毒转导实验,转导2d后用倒置荧光显微镜观察绿色荧光蛋白在不同哺乳动物BMSCs中的表达,并用流式细胞仪检测重组杆状病毒对不同哺乳动物BMSCs的转导效率.结果显示:原代培养的小鼠、大鼠、猪、恒河猴及人的BMSCs于体外传代3次以上后,细胞呈现较均一的梭形,漩涡状生长;倒置荧光显微镜观察显示,与小鼠、大鼠、猪的BMSCs相比,恒河猴及人有更多BMSCs表达绿色荧光蛋白,且荧光强度较强;杆状病毒对小鼠、大鼠、猪、恒河猴及人的BMSCs的转导效率分别为(21.21±3.02)%、(22.51±4.48)%、(39.13±5.79)%、(71.16±5.36)%及(70.67±3.74)%.上述结果表明,重组杆状病毒对不同哺乳动物BMSCs的转导效率不同,对恒河猴及人的BMSCs转导效率较高,说明重组杆状病毒可作为人或灵长类动物BMSCs基因修饰研究领域中更理想的基因载体.
桿狀病毒作為一種新型基因載體,若能有效轉導不同哺乳動物骨髓來源間充質榦細胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells, BMSCs),將會成為榦細胞基因脩飾研究領域中更理想的一種基因載體.本文探討瞭重組桿狀病毒(BacV-CMV-EGFP)對不同哺乳動物BMSCs的轉導效率.體外原代培養小鼠、大鼠、豬、恆河猴及人的BMSCs.用培養3代以上的哺乳動物BMSCs進行病毒轉導實驗,轉導2d後用倒置熒光顯微鏡觀察綠色熒光蛋白在不同哺乳動物BMSCs中的錶達,併用流式細胞儀檢測重組桿狀病毒對不同哺乳動物BMSCs的轉導效率.結果顯示:原代培養的小鼠、大鼠、豬、恆河猴及人的BMSCs于體外傳代3次以上後,細胞呈現較均一的梭形,漩渦狀生長;倒置熒光顯微鏡觀察顯示,與小鼠、大鼠、豬的BMSCs相比,恆河猴及人有更多BMSCs錶達綠色熒光蛋白,且熒光彊度較彊;桿狀病毒對小鼠、大鼠、豬、恆河猴及人的BMSCs的轉導效率分彆為(21.21±3.02)%、(22.51±4.48)%、(39.13±5.79)%、(71.16±5.36)%及(70.67±3.74)%.上述結果錶明,重組桿狀病毒對不同哺乳動物BMSCs的轉導效率不同,對恆河猴及人的BMSCs轉導效率較高,說明重組桿狀病毒可作為人或靈長類動物BMSCs基因脩飾研究領域中更理想的基因載體.
간상병독작위일충신형기인재체,약능유효전도불동포유동물골수래원간충질간세포(bone marrow-derived mesenchymal stem cells, BMSCs),장회성위간세포기인수식연구영역중경이상적일충기인재체.본문탐토료중조간상병독(BacV-CMV-EGFP)대불동포유동물BMSCs적전도효솔.체외원대배양소서、대서、저、항하후급인적BMSCs.용배양3대이상적포유동물BMSCs진행병독전도실험,전도2d후용도치형광현미경관찰록색형광단백재불동포유동물BMSCs중적표체,병용류식세포의검측중조간상병독대불동포유동물BMSCs적전도효솔.결과현시:원대배양적소서、대서、저、항하후급인적BMSCs우체외전대3차이상후,세포정현교균일적사형,선와상생장;도치형광현미경관찰현시,여소서、대서、저적BMSCs상비,항하후급인유경다BMSCs표체록색형광단백,차형광강도교강;간상병독대소서、대서、저、항하후급인적BMSCs적전도효솔분별위(21.21±3.02)%、(22.51±4.48)%、(39.13±5.79)%、(71.16±5.36)%급(70.67±3.74)%.상술결과표명,중조간상병독대불동포유동물BMSCs적전도효솔불동,대항하후급인적BMSCs전도효솔교고,설명중조간상병독가작위인혹령장류동물BMSCs기인수식연구영역중경이상적기인재체.
