湖北大学学报（自然科学版）
湖北大學學報（自然科學版）
호북대학학보（자연과학판）
2008年
3期
290-293
,共4页
李长春%乔富兴%严晓锋%丁全如%黄邦全
李長春%喬富興%嚴曉鋒%丁全如%黃邦全
리장춘%교부흥%엄효봉%정전여%황방전
甘蓝型油菜%硫甙%thiohydroximate S-glucosyltransferase%hpRNAi载体%转基因
甘藍型油菜%硫甙%thiohydroximate S-glucosyltransferase%hpRNAi載體%轉基因
감람형유채%류대%thiohydroximate S-glucosyltransferase%hpRNAi재체%전기인
根据发表的甘蓝型油菜S-GT基因cDNA序列设计引物,以甘蓝型油菜总DNA为模板进行PCR扩增,获得S-GT基因全长.根据获得的基因序列设计引物扩增出S-GT基因序列相同但是带有不同酶切位点的两个片段,将两个片段反向插入到带有本实验所构建的种子特异表达载体内含子的两端,成功构建了油菜S-GT基因的种子特异性hpRNAi载体.通过根瘤农杆菌EHA105介导,转化甘蓝型油菜‘hubu 11'的子叶柄,诱导愈伤组织分化出绿芽,进而再生出完整的植株.通过PCR初步鉴定获得了58株转基因阳性植株.
根據髮錶的甘藍型油菜S-GT基因cDNA序列設計引物,以甘藍型油菜總DNA為模闆進行PCR擴增,穫得S-GT基因全長.根據穫得的基因序列設計引物擴增齣S-GT基因序列相同但是帶有不同酶切位點的兩箇片段,將兩箇片段反嚮插入到帶有本實驗所構建的種子特異錶達載體內含子的兩耑,成功構建瞭油菜S-GT基因的種子特異性hpRNAi載體.通過根瘤農桿菌EHA105介導,轉化甘藍型油菜‘hubu 11'的子葉柄,誘導愈傷組織分化齣綠芽,進而再生齣完整的植株.通過PCR初步鑒定穫得瞭58株轉基因暘性植株.
근거발표적감람형유채S-GT기인cDNA서렬설계인물,이감람형유채총DNA위모판진행PCR확증,획득S-GT기인전장.근거획득적기인서렬설계인물확증출S-GT기인서렬상동단시대유불동매절위점적량개편단,장량개편단반향삽입도대유본실험소구건적충자특이표체재체내함자적량단,성공구건료유채S-GT기인적충자특이성hpRNAi재체.통과근류농간균EHA105개도,전화감람형유채‘hubu 11'적자협병,유도유상조직분화출록아,진이재생출완정적식주.통과PCR초보감정획득료58주전기인양성식주.
