中国农业科技导报
中國農業科技導報
중국농업과기도보
REVIEW OF CHINA AGRICULTURAL SCIENCE AND TECHNOLOGY
2009年
4期
71-76
,共6页
孙雯%许丽%张双宇%田健%初晓宇%伍宁丰
孫雯%許麗%張雙宇%田健%初曉宇%伍寧豐
손문%허려%장쌍우%전건%초효우%오저봉
甲基对硫磷%4-硝基酚%假单胞菌%TAIL-PCR%偏苯三酚1,2-双加氧酶
甲基對硫燐%4-硝基酚%假單胞菌%TAIL-PCR%偏苯三酚1,2-雙加氧酶
갑기대류린%4-초기분%가단포균%TAIL-PCR%편분삼분1,2-쌍가양매
通过富集培养的方法从农药厂废水曝气池的活性污泥中筛选到了一株既具有甲基对硫磷降解活性又可以有效降解4-硝基酚的高效菌株1-7,经16S rDNA鉴定为假单胞菌(Pseudomonas sp.).根据4-硝基酚降解相关基因保守区设计简并引物扩增小片段,再应用TAIL-PCR克隆得到偏苯三酚1,2-双加氧酶基因dio1,基因全长873 bp,编码290个氨基酸,酶蛋白理论分子量为32.8 kDa. doi1基因在E. coli BL21中过量表达,并通过Ni-NTA亲和层析纯化,结果表明该酶具有正常的生物学活性,证明了假单胞菌1-7可以通过偏苯三酚途径降解4-硝基酚.初步探讨了假单胞菌1-7的4-硝基酚降解机制.
通過富集培養的方法從農藥廠廢水曝氣池的活性汙泥中篩選到瞭一株既具有甲基對硫燐降解活性又可以有效降解4-硝基酚的高效菌株1-7,經16S rDNA鑒定為假單胞菌(Pseudomonas sp.).根據4-硝基酚降解相關基因保守區設計簡併引物擴增小片段,再應用TAIL-PCR剋隆得到偏苯三酚1,2-雙加氧酶基因dio1,基因全長873 bp,編碼290箇氨基痠,酶蛋白理論分子量為32.8 kDa. doi1基因在E. coli BL21中過量錶達,併通過Ni-NTA親和層析純化,結果錶明該酶具有正常的生物學活性,證明瞭假單胞菌1-7可以通過偏苯三酚途徑降解4-硝基酚.初步探討瞭假單胞菌1-7的4-硝基酚降解機製.
통과부집배양적방법종농약엄폐수폭기지적활성오니중사선도료일주기구유갑기대류린강해활성우가이유효강해4-초기분적고효균주1-7,경16S rDNA감정위가단포균(Pseudomonas sp.).근거4-초기분강해상관기인보수구설계간병인물확증소편단,재응용TAIL-PCR극륭득도편분삼분1,2-쌍가양매기인dio1,기인전장873 bp,편마290개안기산,매단백이론분자량위32.8 kDa. doi1기인재E. coli BL21중과량표체,병통과Ni-NTA친화층석순화,결과표명해매구유정상적생물학활성,증명료가단포균1-7가이통과편분삼분도경강해4-초기분.초보탐토료가단포균1-7적4-초기분강해궤제.
