利用酵母双杂交法检测甘蓝SCR与SRK之间的相互作用
이용효모쌍잡교법검측감람SCR여SRK지간적상호작용
Detection of Interactions between SCR and SRK in Brassica oleracea L.by Yeast Two-Hybrid System
  • 万方数据
    作物学报 작물학보
    ACTA AGRONOMICA SINICA
    2011年 4期 579-586 ,共8页

    罗兵%薛丽琰%朱利泉%张贺翠%彭一波%陈松%杨红%杨昆%李成琼%王小佳

    라병%설려염%주리천%장하취%팽일파%진송%양홍%양곤%리성경%왕소가

    甘蓝%S位点受体激酶(SRK)%S位点富含半胱氨酸蛋白(SCR)%酵母双杂交 甘藍%S位點受體激酶(SRK)%S位點富含半胱氨痠蛋白(SCR)%酵母雙雜交
    감람%S위점수체격매(SRK)%S위점부함반광안산단백(SCR)%효모쌍잡교
    为深入研究甘蓝S位点受体激酶(SRK)和S位点富含半胱氨酸蛋白(SCR)间相互识别的分子机理,以具有典型自交不亲和性的甘蓝D3为材料,利用巢式PCR分别扩增SRK胞外域(eSRK)和SCR,通过酵母双杂交检测二者之间的相互作用,并利用同源重组技术将eSRK与GAL4报告基因DNA活化域融合(pGADT7eSRK)以及SCR与GAL4报告基因DNA结合域融合(pGBKT7SCR).两种重组质粒分别转化酵母Y187和Y2HGold后未出现自激活现象.融合的二倍体酵母(pGADT7eSRK×pGBKT7SCR)能在选择性固体培养基(SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/X-a-Gal/AbA)上生长,并且菌落呈蓝色.结果表明,eSRK与SCR蛋门能够相互结合,为深入研究二者作用位点成功建立了一个技术平台.
    위심입연구감람S위점수체격매(SRK)화S위점부함반광안산단백(SCR)간상호식별적분자궤리,이구유전형자교불친화성적감람D3위재료,이용소식PCR분별확증SRK포외역(eSRK)화SCR,통과효모쌍잡교검측이자지간적상호작용,병이용동원중조기술장eSRK여GAL4보고기인DNA활화역융합(pGADT7eSRK)이급SCR여GAL4보고기인DNA결합역융합(pGBKT7SCR).량충중조질립분별전화효모Y187화Y2HGold후미출현자격활현상.융합적이배체효모(pGADT7eSRK×pGBKT7SCR)능재선택성고체배양기(SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/X-a-Gal/AbA)상생장,병차균락정람색.결과표명,eSRK여SCR단문능구상호결합,위심입연구이자작용위점성공건립료일개기술평태.
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