中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2011年
24期
4468-4472
,共5页
鲍晓明%程晓曙%黄晓%王耀晟%李菊香%洪葵
鮑曉明%程曉曙%黃曉%王耀晟%李菊香%洪葵
포효명%정효서%황효%왕요성%리국향%홍규
低温%心肌细胞%Bim%蛋白%PI3K/Akt%细胞凋亡
低溫%心肌細胞%Bim%蛋白%PI3K/Akt%細胞凋亡
저온%심기세포%Bim%단백%PI3K/Akt%세포조망
背景:寒冷刺激可引发心血管疾病或导致其加重,研究极端气候条件下心血管疾病的发病规律及其分子生物学机制对制定有效的防范和治疗措施有重要意义.目的:观察低温对心肌细胞凋亡率、乳酸脱氢酶活性及促凋亡蛋白Bim 表达的影响,并从PI3K/Akt 信号通路探讨低温影响心肌细胞中Bim 表达的可能途径.方法:将体外培养的心肌细胞在4 ℃冷水浴中处理1 h 后,放入37 ℃CO2 培养箱中继续培养0,4,8,12,16,24 h,Annexin V-FITC/PI 双染检测细胞凋亡率,MTS/PMS 法检测细胞存活情况,全自动生化分析仪测细胞培养基中乳酸脱氢酶活性.Western blot 测定Bim 在心肌细胞中的表达情况,并在Bim 蛋白开始表达的时间点向培养的心肌细胞中加入PI3K/Akt 阻断剂LY29004,观察心肌细胞凋亡率、乳酸脱氢酶活性及Bim、p-PI3K 蛋白表达的变化.结果与结论:冷处理后,心肌细胞凋亡率增加、存活率降低、培养基中乳酸脱氢酶活性增高、Bim 表达增加(P < 0.05),均在冷处理后24 h 达到极点.加入LY29004 后,心肌细胞凋亡率增加更明显,培养基中乳酸脱氢酶活性及Bim 表达也有所增加,p-PI3K 表达降低(P < 0.05).说明低温能够通过促进Bim 表达诱导心肌细胞凋亡,而PI3K/AKT 信号通路可能参与了Bim 的诱导表达.
揹景:寒冷刺激可引髮心血管疾病或導緻其加重,研究極耑氣候條件下心血管疾病的髮病規律及其分子生物學機製對製定有效的防範和治療措施有重要意義.目的:觀察低溫對心肌細胞凋亡率、乳痠脫氫酶活性及促凋亡蛋白Bim 錶達的影響,併從PI3K/Akt 信號通路探討低溫影響心肌細胞中Bim 錶達的可能途徑.方法:將體外培養的心肌細胞在4 ℃冷水浴中處理1 h 後,放入37 ℃CO2 培養箱中繼續培養0,4,8,12,16,24 h,Annexin V-FITC/PI 雙染檢測細胞凋亡率,MTS/PMS 法檢測細胞存活情況,全自動生化分析儀測細胞培養基中乳痠脫氫酶活性.Western blot 測定Bim 在心肌細胞中的錶達情況,併在Bim 蛋白開始錶達的時間點嚮培養的心肌細胞中加入PI3K/Akt 阻斷劑LY29004,觀察心肌細胞凋亡率、乳痠脫氫酶活性及Bim、p-PI3K 蛋白錶達的變化.結果與結論:冷處理後,心肌細胞凋亡率增加、存活率降低、培養基中乳痠脫氫酶活性增高、Bim 錶達增加(P < 0.05),均在冷處理後24 h 達到極點.加入LY29004 後,心肌細胞凋亡率增加更明顯,培養基中乳痠脫氫酶活性及Bim 錶達也有所增加,p-PI3K 錶達降低(P < 0.05).說明低溫能夠通過促進Bim 錶達誘導心肌細胞凋亡,而PI3K/AKT 信號通路可能參與瞭Bim 的誘導錶達.
배경:한랭자격가인발심혈관질병혹도치기가중,연구겁단기후조건하심혈관질병적발병규률급기분자생물학궤제대제정유효적방범화치료조시유중요의의.목적:관찰저온대심기세포조망솔、유산탈경매활성급촉조망단백Bim 표체적영향,병종PI3K/Akt 신호통로탐토저온영향심기세포중Bim 표체적가능도경.방법:장체외배양적심기세포재4 ℃랭수욕중처리1 h 후,방입37 ℃CO2 배양상중계속배양0,4,8,12,16,24 h,Annexin V-FITC/PI 쌍염검측세포조망솔,MTS/PMS 법검측세포존활정황,전자동생화분석의측세포배양기중유산탈경매활성.Western blot 측정Bim 재심기세포중적표체정황,병재Bim 단백개시표체적시간점향배양적심기세포중가입PI3K/Akt 조단제LY29004,관찰심기세포조망솔、유산탈경매활성급Bim、p-PI3K 단백표체적변화.결과여결론:랭처리후,심기세포조망솔증가、존활솔강저、배양기중유산탈경매활성증고、Bim 표체증가(P < 0.05),균재랭처리후24 h 체도겁점.가입LY29004 후,심기세포조망솔증가경명현,배양기중유산탈경매활성급Bim 표체야유소증가,p-PI3K 표체강저(P < 0.05).설명저온능구통과촉진Bim 표체유도심기세포조망,이PI3K/AKT 신호통로가능삼여료Bim 적유도표체.