华南农业大学学报
華南農業大學學報
화남농업대학학보
JOURNAL OF SOUTH CHINA AGRICULTURAL UNIVERSITY
2012年
1期
102-105
,共4页
张良%黄永亮%官培英%王怡飞%徐晓娟%吴晓薇%郭霄峰
張良%黃永亮%官培英%王怡飛%徐曉娟%吳曉薇%郭霄峰
장량%황영량%관배영%왕이비%서효연%오효미%곽소봉
狂犬病病毒%核蛋白%原核表达
狂犬病病毒%覈蛋白%原覈錶達
광견병병독%핵단백%원핵표체
为了高效表达狂犬病病毒HEP-Flury的核蛋白,选取抗原决定簇富集区,利用生物信息学技术分析了狂犬病病毒HEP-Flury N蛋白的核苷酸序列.根据大肠埃希菌Escherichia coli对密码子的偏嗜性,首先对所选取的核苷酸序列进行修饰、引入酶切位点,然后定向克隆至原核表达载体pET-32a(+),构建重组质粒pET-32-NP.将其转化表达宿主菌Escherichia coli BL21( DE3) pLysS,以IPTG诱导表达.表达产物经SDS-PAGE电泳,发现在相对分子质量34 000处有1条特异的蛋白带,与预期大小一致.Western-blotting检测结果显示,该蛋白可被鼠抗His单克隆抗体及犬抗RV多克隆抗体特异识别,表明所表达的N蛋白具有良好的免疫原性.
為瞭高效錶達狂犬病病毒HEP-Flury的覈蛋白,選取抗原決定簇富集區,利用生物信息學技術分析瞭狂犬病病毒HEP-Flury N蛋白的覈苷痠序列.根據大腸埃希菌Escherichia coli對密碼子的偏嗜性,首先對所選取的覈苷痠序列進行脩飾、引入酶切位點,然後定嚮剋隆至原覈錶達載體pET-32a(+),構建重組質粒pET-32-NP.將其轉化錶達宿主菌Escherichia coli BL21( DE3) pLysS,以IPTG誘導錶達.錶達產物經SDS-PAGE電泳,髮現在相對分子質量34 000處有1條特異的蛋白帶,與預期大小一緻.Western-blotting檢測結果顯示,該蛋白可被鼠抗His單剋隆抗體及犬抗RV多剋隆抗體特異識彆,錶明所錶達的N蛋白具有良好的免疫原性.
위료고효표체광견병병독HEP-Flury적핵단백,선취항원결정족부집구,이용생물신식학기술분석료광견병병독HEP-Flury N단백적핵감산서렬.근거대장애희균Escherichia coli대밀마자적편기성,수선대소선취적핵감산서렬진행수식、인입매절위점,연후정향극륭지원핵표체재체pET-32a(+),구건중조질립pET-32-NP.장기전화표체숙주균Escherichia coli BL21( DE3) pLysS,이IPTG유도표체.표체산물경SDS-PAGE전영,발현재상대분자질량34 000처유1조특이적단백대,여예기대소일치.Western-blotting검측결과현시,해단백가피서항His단극륭항체급견항RV다극륭항체특이식별,표명소표체적N단백구유량호적면역원성.
