复旦学报(自然科学版)
複旦學報(自然科學版)
복단학보(자연과학판)
JOURNAL OF FUDAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2003年
1期
98-102
,共5页
徐天宏%任婧%徐荣%邓可京
徐天宏%任婧%徐榮%鄧可京
서천굉%임청%서영%산가경
SNF1A基因%显微注射%转基因果蝇%GAL4品系
SNF1A基因%顯微註射%轉基因果蠅%GAL4品繫
SNF1A기인%현미주사%전기인과승%GAL4품계
将质粒GH12596中的果蝇SNF1A cDNA用PCR方法扩增,并与pEGFP-N2质粒中的荧光蛋白GFP编码序列连接入果蝇转基因载体pUAST上,构建了UAS-SNF1A-GFP质粒. 转入果蝇细胞内,利用mini-white标记基因筛选,得到3个独立的转基因果蝇品系. 将这些转基因果蝇品系分别定位平衡,并用单果蝇PCR方法加以佐证. 然后将转基因品系分别与eyGAL4,actin-GAL4,pGMR-GAL4等3个GAL4果蝇品系交配,在荧光显微镜下检测到该基因在果蝇中的表达. 从而确认了用显微注射技术能够得到稳定的转基因果蝇模型,为开展用果蝇GAL4-UAS系统大规模研究基因功能奠定了基础.
將質粒GH12596中的果蠅SNF1A cDNA用PCR方法擴增,併與pEGFP-N2質粒中的熒光蛋白GFP編碼序列連接入果蠅轉基因載體pUAST上,構建瞭UAS-SNF1A-GFP質粒. 轉入果蠅細胞內,利用mini-white標記基因篩選,得到3箇獨立的轉基因果蠅品繫. 將這些轉基因果蠅品繫分彆定位平衡,併用單果蠅PCR方法加以佐證. 然後將轉基因品繫分彆與eyGAL4,actin-GAL4,pGMR-GAL4等3箇GAL4果蠅品繫交配,在熒光顯微鏡下檢測到該基因在果蠅中的錶達. 從而確認瞭用顯微註射技術能夠得到穩定的轉基因果蠅模型,為開展用果蠅GAL4-UAS繫統大規模研究基因功能奠定瞭基礎.
장질립GH12596중적과승SNF1A cDNA용PCR방법확증,병여pEGFP-N2질립중적형광단백GFP편마서렬련접입과승전기인재체pUAST상,구건료UAS-SNF1A-GFP질립. 전입과승세포내,이용mini-white표기기인사선,득도3개독립적전기인과승품계. 장저사전기인과승품계분별정위평형,병용단과승PCR방법가이좌증. 연후장전기인품계분별여eyGAL4,actin-GAL4,pGMR-GAL4등3개GAL4과승품계교배,재형광현미경하검측도해기인재과승중적표체. 종이학인료용현미주사기술능구득도은정적전기인과승모형,위개전용과승GAL4-UAS계통대규모연구기인공능전정료기출.
