中华内分泌代谢杂志
中華內分泌代謝雜誌
중화내분비대사잡지
CHINESE JOURNAL OF ENDOCRINOLOGY AND METABOLISM
2004年
2期
148-150
,共3页
胡三梅%章国卫%陈凤玲%李荣英%陈家伦%陆振虞%宋怀东
鬍三梅%章國衛%陳鳳玲%李榮英%陳傢倫%陸振虞%宋懷東
호삼매%장국위%진봉령%리영영%진가륜%륙진우%송부동
生长激素%克隆,分子%表达载体%重组融合蛋白质类
生長激素%剋隆,分子%錶達載體%重組融閤蛋白質類
생장격소%극륭,분자%표체재체%중조융합단백질류
目的构建含新的生长激素异形体(GHv)基因全长编码区的pGEM-T Easy质粒和GHv-谷胱甘肽转硫酶(GST)融合蛋白的表达质粒并在大肠杆菌表达出其融合蛋白.方法采用克隆和亚克隆技术构建GHv-GST融合基因的表达质粒,转化大肠杆菌BL21并用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导其表达GHv-GST融合蛋白,谷胱甘肽-Sepharose 4B纯化试剂盒纯化融合蛋白.结果含GHv-GST融合基因表达质粒的大肠杆菌表达出相对分子质量约43000的GHv-GST融合蛋白,SDS-PAGE结果显示纯化的融合蛋白为单一条带.结论成功构建成GHv-GST融合基因的表达质粒并且GHv-GST融合蛋白在大肠杆菌BL21中有高表达.上述工作为制备多抗,深入研究GHv基因的功能奠定了基础.
目的構建含新的生長激素異形體(GHv)基因全長編碼區的pGEM-T Easy質粒和GHv-穀胱甘肽轉硫酶(GST)融閤蛋白的錶達質粒併在大腸桿菌錶達齣其融閤蛋白.方法採用剋隆和亞剋隆技術構建GHv-GST融閤基因的錶達質粒,轉化大腸桿菌BL21併用異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)誘導其錶達GHv-GST融閤蛋白,穀胱甘肽-Sepharose 4B純化試劑盒純化融閤蛋白.結果含GHv-GST融閤基因錶達質粒的大腸桿菌錶達齣相對分子質量約43000的GHv-GST融閤蛋白,SDS-PAGE結果顯示純化的融閤蛋白為單一條帶.結論成功構建成GHv-GST融閤基因的錶達質粒併且GHv-GST融閤蛋白在大腸桿菌BL21中有高錶達.上述工作為製備多抗,深入研究GHv基因的功能奠定瞭基礎.
목적구건함신적생장격소이형체(GHv)기인전장편마구적pGEM-T Easy질립화GHv-곡광감태전류매(GST)융합단백적표체질립병재대장간균표체출기융합단백.방법채용극륭화아극륭기술구건GHv-GST융합기인적표체질립,전화대장간균BL21병용이병기류대반유당감(IPTG)유도기표체GHv-GST융합단백,곡광감태-Sepharose 4B순화시제합순화융합단백.결과함GHv-GST융합기인표체질립적대장간균표체출상대분자질량약43000적GHv-GST융합단백,SDS-PAGE결과현시순화적융합단백위단일조대.결론성공구건성GHv-GST융합기인적표체질립병차GHv-GST융합단백재대장간균BL21중유고표체.상술공작위제비다항,심입연구GHv기인적공능전정료기출.
