病毒学报
病毒學報
병독학보
CHINESE JOURNAL OF VIROLOGY
2007年
3期
218-223
,共6页
左天荣%赵子轶%韦平%韦信贤%李娅%磨美兰
左天榮%趙子軼%韋平%韋信賢%李婭%磨美蘭
좌천영%조자질%위평%위신현%리아%마미란
马立克氏病病毒%分离与鉴定%免疫荧光试验%聚合酶链式反应%致瘤性
馬立剋氏病病毒%分離與鑒定%免疫熒光試驗%聚閤酶鏈式反應%緻瘤性
마립극씨병병독%분리여감정%면역형광시험%취합매련식반응%치류성
应用鸭胚成纤维细胞(DEF)从免疫过CVI988/Rispens疫苗株患马立克氏病(MD)的三黄鸡中分离到一株马立克氏病病毒(MDV)(命名为YL040920株).从该分离株蚀斑克隆获得的9个克隆在蚀斑形成时间及其形态大小上均无明显差别,表明它较为单一;应用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增并测定了毒株的致瘤相关基因meq的核苷酸序列,并与其他MDV-1参考毒株的序列进行比较分析,发现其序列具有MDV-1强毒株的特征;用基于抗MDV-1 MEQ蛋白的单克隆抗体3G12E6的免疫荧光试验(FA)对毒株的DEF培养物进行检测,发现有特异性的荧光定位于细胞核内;应用毒株感染霞烟鸡,最早在接种后(PI)21d即可诱发明显的内脏器官,在各器官肿瘤中以心脏、肝脏和皮肤的肿瘤发生率最高;用禽肿瘤病三重PCR鉴别诊断技术对毒株的DEF培养物以及感染鸡的内脏器官组织进行检测,均能扩增到MDV-1强毒株的特异性带,而网状内皮增生症病毒(REV)和禽白血病病毒(ALV)的检测则均为阴性.研究的结果表明,分离株YL040920为单一的MDV-1强毒株,无REV、ALV以及疫苗株CVI988/Rispens的混杂,并具有以心脏、肝脏和皮肤肿瘤为主的急性致瘤特性.
應用鴨胚成纖維細胞(DEF)從免疫過CVI988/Rispens疫苗株患馬立剋氏病(MD)的三黃鷄中分離到一株馬立剋氏病病毒(MDV)(命名為YL040920株).從該分離株蝕斑剋隆穫得的9箇剋隆在蝕斑形成時間及其形態大小上均無明顯差彆,錶明它較為單一;應用聚閤酶鏈式反應(PCR)技術擴增併測定瞭毒株的緻瘤相關基因meq的覈苷痠序列,併與其他MDV-1參攷毒株的序列進行比較分析,髮現其序列具有MDV-1彊毒株的特徵;用基于抗MDV-1 MEQ蛋白的單剋隆抗體3G12E6的免疫熒光試驗(FA)對毒株的DEF培養物進行檢測,髮現有特異性的熒光定位于細胞覈內;應用毒株感染霞煙鷄,最早在接種後(PI)21d即可誘髮明顯的內髒器官,在各器官腫瘤中以心髒、肝髒和皮膚的腫瘤髮生率最高;用禽腫瘤病三重PCR鑒彆診斷技術對毒株的DEF培養物以及感染鷄的內髒器官組織進行檢測,均能擴增到MDV-1彊毒株的特異性帶,而網狀內皮增生癥病毒(REV)和禽白血病病毒(ALV)的檢測則均為陰性.研究的結果錶明,分離株YL040920為單一的MDV-1彊毒株,無REV、ALV以及疫苗株CVI988/Rispens的混雜,併具有以心髒、肝髒和皮膚腫瘤為主的急性緻瘤特性.
응용압배성섬유세포(DEF)종면역과CVI988/Rispens역묘주환마립극씨병(MD)적삼황계중분리도일주마립극씨병병독(MDV)(명명위YL040920주).종해분리주식반극륭획득적9개극륭재식반형성시간급기형태대소상균무명현차별,표명타교위단일;응용취합매련식반응(PCR)기술확증병측정료독주적치류상관기인meq적핵감산서렬,병여기타MDV-1삼고독주적서렬진행비교분석,발현기서렬구유MDV-1강독주적특정;용기우항MDV-1 MEQ단백적단극륭항체3G12E6적면역형광시험(FA)대독주적DEF배양물진행검측,발현유특이성적형광정위우세포핵내;응용독주감염하연계,최조재접충후(PI)21d즉가유발명현적내장기관,재각기관종류중이심장、간장화피부적종류발생솔최고;용금종류병삼중PCR감별진단기술대독주적DEF배양물이급감염계적내장기관조직진행검측,균능확증도MDV-1강독주적특이성대,이망상내피증생증병독(REV)화금백혈병병독(ALV)적검측칙균위음성.연구적결과표명,분리주YL040920위단일적MDV-1강독주,무REV、ALV이급역묘주CVI988/Rispens적혼잡,병구유이심장、간장화피부종류위주적급성치류특성.