哈尔滨工业大学学报
哈爾濱工業大學學報
합이빈공업대학학보
JOURNAL OF HARBIN INSTITUTE OF TECHNOLOGY
2008年
8期
1329-1333
,共5页
小球藻%植酸酶%电激法%基因表达
小毬藻%植痠酶%電激法%基因錶達
소구조%식산매%전격법%기인표체
为建立海水小球藻外源基因转化系统,使外源植酸酶基因在海水小球藻细胞内获得稳定表达,利用电激法将植酸酶基因与海水小球藻细胞共转化;利用含G418的抗性平板筛选抗性藻株,并对所获得的抗性藻株依次进行PCR检测、Southern杂交分析和植酸酶活性与性质的检测.经过转化处理的微藻细胞在含G418的抗性平板上培养3周后,每个平板有10～30个抗性藻株长出;在这些抗性藻株中,PCR检测的阳性率为40.16%;Southern杂交分析和植酸酶活性检测证明,植酸酶外源基因已经在小球藻细胞中获得正确表达.植酸酶外源基因在海水小球藻细胞内被成功表达.
為建立海水小毬藻外源基因轉化繫統,使外源植痠酶基因在海水小毬藻細胞內穫得穩定錶達,利用電激法將植痠酶基因與海水小毬藻細胞共轉化;利用含G418的抗性平闆篩選抗性藻株,併對所穫得的抗性藻株依次進行PCR檢測、Southern雜交分析和植痠酶活性與性質的檢測.經過轉化處理的微藻細胞在含G418的抗性平闆上培養3週後,每箇平闆有10～30箇抗性藻株長齣;在這些抗性藻株中,PCR檢測的暘性率為40.16%;Southern雜交分析和植痠酶活性檢測證明,植痠酶外源基因已經在小毬藻細胞中穫得正確錶達.植痠酶外源基因在海水小毬藻細胞內被成功錶達.
위건립해수소구조외원기인전화계통,사외원식산매기인재해수소구조세포내획득은정표체,이용전격법장식산매기인여해수소구조세포공전화;이용함G418적항성평판사선항성조주,병대소획득적항성조주의차진행PCR검측、Southern잡교분석화식산매활성여성질적검측.경과전화처리적미조세포재함G418적항성평판상배양3주후,매개평판유10～30개항성조주장출;재저사항성조주중,PCR검측적양성솔위40.16%;Southern잡교분석화식산매활성검측증명,식산매외원기인이경재소구조세포중획득정학표체.식산매외원기인재해수소구조세포내피성공표체.
