江苏农业学报
江囌農業學報
강소농업학보
JIANGSU JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2010年
2期
359-363
,共5页
陈红英%崔沛%方忠意%李新生%崔保安
陳紅英%崔沛%方忠意%李新生%崔保安
진홍영%최패%방충의%리신생%최보안
禽流感病毒%重组核蛋白%NP-ELISA%抗体检测
禽流感病毒%重組覈蛋白%NP-ELISA%抗體檢測
금류감병독%중조핵단백%NP-ELISA%항체검측
以大肠杆菌系统表达的H9亚型禽流感病毒(AIV)核蛋白(NP)为抗原包被ELISA板,通过反应条件的筛选,建立检测禽流感抗体的重组核蛋白间接ELISA(NP-ELISA)方法.结果表明,抗原最佳包被质量浓度为7.56 μg/ml,血清最适稀释度为1:160,作用时间为60 min;辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗鸡IgG最适稀释度为1:5 000,血清和酶标抗体最适作用时间为60 min.特异性试验结果表明,NP抗原可与H5、H7和H9亚型AIV特异性抗体发生反应,经NP-ELISA检测为阳性的H9亚型AI血清样品能够被H9亚型AIV阻断,而NP抗原与新城疫等4种疫病阳性血清不发生反应.对223份待检鸡血清进行检测,NP-ELISA阳性检出率为96.86%(216/223),而血凝抑制试验、琼脂免疫扩散试验结果分别为93.72%(209/223)和81.61%(182/223),表明NP-ELISA是检测禽流感型特异性抗体的一种特异、敏感、快速、经济的血清学检测技术.
以大腸桿菌繫統錶達的H9亞型禽流感病毒(AIV)覈蛋白(NP)為抗原包被ELISA闆,通過反應條件的篩選,建立檢測禽流感抗體的重組覈蛋白間接ELISA(NP-ELISA)方法.結果錶明,抗原最佳包被質量濃度為7.56 μg/ml,血清最適稀釋度為1:160,作用時間為60 min;辣根過氧化物酶(HRP)標記的羊抗鷄IgG最適稀釋度為1:5 000,血清和酶標抗體最適作用時間為60 min.特異性試驗結果錶明,NP抗原可與H5、H7和H9亞型AIV特異性抗體髮生反應,經NP-ELISA檢測為暘性的H9亞型AI血清樣品能夠被H9亞型AIV阻斷,而NP抗原與新城疫等4種疫病暘性血清不髮生反應.對223份待檢鷄血清進行檢測,NP-ELISA暘性檢齣率為96.86%(216/223),而血凝抑製試驗、瓊脂免疫擴散試驗結果分彆為93.72%(209/223)和81.61%(182/223),錶明NP-ELISA是檢測禽流感型特異性抗體的一種特異、敏感、快速、經濟的血清學檢測技術.
이대장간균계통표체적H9아형금류감병독(AIV)핵단백(NP)위항원포피ELISA판,통과반응조건적사선,건립검측금류감항체적중조핵단백간접ELISA(NP-ELISA)방법.결과표명,항원최가포피질량농도위7.56 μg/ml,혈청최괄희석도위1:160,작용시간위60 min;랄근과양화물매(HRP)표기적양항계IgG최괄희석도위1:5 000,혈청화매표항체최괄작용시간위60 min.특이성시험결과표명,NP항원가여H5、H7화H9아형AIV특이성항체발생반응,경NP-ELISA검측위양성적H9아형AI혈청양품능구피H9아형AIV조단,이NP항원여신성역등4충역병양성혈청불발생반응.대223빈대검계혈청진행검측,NP-ELISA양성검출솔위96.86%(216/223),이혈응억제시험、경지면역확산시험결과분별위93.72%(209/223)화81.61%(182/223),표명NP-ELISA시검측금류감형특이성항체적일충특이、민감、쾌속、경제적혈청학검측기술.