江西农业大学学报
江西農業大學學報
강서농업대학학보
ACTA AGRICULTURAE UNIVERSITATIS JIANGXIENSIS
2012年
1期
134-140
,共7页
周秋白%朱长生%郑宇%江波%罗晓燕
週鞦白%硃長生%鄭宇%江波%囉曉燕
주추백%주장생%정우%강파%라효연
黄鳝%去饱和酶%延长酶%基因克隆与表达%LC-PUFAs
黃鱔%去飽和酶%延長酶%基因剋隆與錶達%LC-PUFAs
황선%거포화매%연장매%기인극륭여표체%LC-PUFAs
为了解黄鳝合成长链多不饱和脂肪酸(LC-PUFA)的能力,利用Trizol提取黄鳝肝脏总RNA,经RT获得cDNA,基于脂肪酸去饱和酶(FAD)及延长酶(FAE)基因同源系列设计简并引物进行黄鳝cDNA的PCR扩增、测序,获得黄鳝FAD及FAE基因部分片段序列.然后分析黄鳝FAD及FAE的同源性和系统进化情况及黄鳝胚胎和胚后发育期仔鱼该两个基因的表达水平.结果表明:黄鳝FAD与军曹鱼的Δ6去饱和酶同源性高达85%,其次是大菱鲆(83%),FAE与军曹鱼、线鳢、澳大利亚金枪鱼等的同源性高达89%;但FAD和FAE在系统发育树中均自呈一支.FAD和FAE基因在黄鳝胚胎和胚后发育阶段均有表达,以出膜后2~4d表达量最高.提示黄鳝具有合成LC -PUFA的能力,但不同发育阶段合成能力不同.
為瞭解黃鱔閤成長鏈多不飽和脂肪痠(LC-PUFA)的能力,利用Trizol提取黃鱔肝髒總RNA,經RT穫得cDNA,基于脂肪痠去飽和酶(FAD)及延長酶(FAE)基因同源繫列設計簡併引物進行黃鱔cDNA的PCR擴增、測序,穫得黃鱔FAD及FAE基因部分片段序列.然後分析黃鱔FAD及FAE的同源性和繫統進化情況及黃鱔胚胎和胚後髮育期仔魚該兩箇基因的錶達水平.結果錶明:黃鱔FAD與軍曹魚的Δ6去飽和酶同源性高達85%,其次是大蔆鲆(83%),FAE與軍曹魚、線鱧、澳大利亞金鎗魚等的同源性高達89%;但FAD和FAE在繫統髮育樹中均自呈一支.FAD和FAE基因在黃鱔胚胎和胚後髮育階段均有錶達,以齣膜後2~4d錶達量最高.提示黃鱔具有閤成LC -PUFA的能力,但不同髮育階段閤成能力不同.
위료해황선합성장련다불포화지방산(LC-PUFA)적능력,이용Trizol제취황선간장총RNA,경RT획득cDNA,기우지방산거포화매(FAD)급연장매(FAE)기인동원계렬설계간병인물진행황선cDNA적PCR확증、측서,획득황선FAD급FAE기인부분편단서렬.연후분석황선FAD급FAE적동원성화계통진화정황급황선배태화배후발육기자어해량개기인적표체수평.결과표명:황선FAD여군조어적Δ6거포화매동원성고체85%,기차시대릉평(83%),FAE여군조어、선례、오대리아금창어등적동원성고체89%;단FAD화FAE재계통발육수중균자정일지.FAD화FAE기인재황선배태화배후발육계단균유표체,이출막후2~4d표체량최고.제시황선구유합성LC -PUFA적능력,단불동발육계단합성능력불동.