武汉植物学研究
武漢植物學研究
무한식물학연구
JOURNAL OF WUHAN BOTANICAL RESEARCH
2005年
6期
568-571
,共4页
王珏%罗立廷%陈明洁%李洋%张金锐%何光源
王玨%囉立廷%陳明潔%李洋%張金銳%何光源
왕각%라립정%진명길%리양%장금예%하광원
Puroindoline蛋白%面粉%提取与纯化%Triton X-114%SDS-PAGE
Puroindoline蛋白%麵粉%提取與純化%Triton X-114%SDS-PAGE
Puroindoline단백%면분%제취여순화%Triton X-114%SDS-PAGE
Puroindoline蛋白是小麦面粉中一种非常重要的蛋白质,不仅影响和决定了籽粒的硬度,而且有抗G+、G-菌以及抗真菌的作用.用含4% Triton X-114、 100 mmol/L pH7.8 Tris-HCl缓冲液处理小麦面粉来分离Puroindoline蛋白,经处理后得到的蛋白质混合溶液首先用分子筛葡聚糖G-75纯化,每个收集管内的组分经SDS-PAGE分析,分子量小于31 kD的蛋白质组分被回收和集中,回收的蛋白质组分经PEG20000浓缩后,再用离子交换柱羧甲基纤维素(CM-23)进行纯化.其洗脱液分别是双蒸水和NaCl,梯度为0.05～0.7 mol/L、8 mmol/L pH5.5的MES缓冲液,回收只含15 kD的蛋白质的组分,接着用PEG20000浓缩,最后冷冻干燥得到Puroindoline蛋白.
Puroindoline蛋白是小麥麵粉中一種非常重要的蛋白質,不僅影響和決定瞭籽粒的硬度,而且有抗G+、G-菌以及抗真菌的作用.用含4% Triton X-114、 100 mmol/L pH7.8 Tris-HCl緩遲液處理小麥麵粉來分離Puroindoline蛋白,經處理後得到的蛋白質混閤溶液首先用分子篩葡聚糖G-75純化,每箇收集管內的組分經SDS-PAGE分析,分子量小于31 kD的蛋白質組分被迴收和集中,迴收的蛋白質組分經PEG20000濃縮後,再用離子交換柱羧甲基纖維素(CM-23)進行純化.其洗脫液分彆是雙蒸水和NaCl,梯度為0.05～0.7 mol/L、8 mmol/L pH5.5的MES緩遲液,迴收隻含15 kD的蛋白質的組分,接著用PEG20000濃縮,最後冷凍榦燥得到Puroindoline蛋白.
Puroindoline단백시소맥면분중일충비상중요적단백질,불부영향화결정료자립적경도,이차유항G+、G-균이급항진균적작용.용함4% Triton X-114、 100 mmol/L pH7.8 Tris-HCl완충액처리소맥면분래분리Puroindoline단백,경처리후득도적단백질혼합용액수선용분자사포취당G-75순화,매개수집관내적조분경SDS-PAGE분석,분자량소우31 kD적단백질조분피회수화집중,회수적단백질조분경PEG20000농축후,재용리자교환주최갑기섬유소(CM-23)진행순화.기세탈액분별시쌍증수화NaCl,제도위0.05～0.7 mol/L、8 mmol/L pH5.5적MES완충액,회수지함15 kD적단백질적조분,접착용PEG20000농축,최후냉동간조득도Puroindoline단백.
