生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2011年
1期
66-70
,共5页
李媛%任长虹%石锦平%李伟光%刘虎岐%张成岗
李媛%任長虹%石錦平%李偉光%劉虎岐%張成崗
리원%임장홍%석금평%리위광%류호기%장성강
秀丽线虫%线虫PCR%多重PCR%基因扩增%突变株系鉴定
秀麗線蟲%線蟲PCR%多重PCR%基因擴增%突變株繫鑒定
수려선충%선충PCR%다중PCR%기인확증%돌변주계감정
目的:直接针对秀丽线虫进行PCR反应,以便快速扩增基因组DNA,从而提高钓取目的基因和鉴定基因组是否发生突变的效率.方法:根据生物信息学分析,针对不同基因设计单重或多重PCR引物;在不含砌DNA聚合酶的PCR反应体系中加入蛋白酶K消化秀丽线虫染色体中的组蛋白,然后加入Taq酶,直接针对野生型或突变型秀丽线虫个体进行PCR反应,无须提前制备基因组DNA.结果:用该方法能直接从秀丽线虫体内的基因组DNA中扩增出目的基因片段,与常规预先制备基因组DNA为模板的扩增产物条带位置一致,且特异性更高.同时,针对不同基因的多重PCR亦能扩增出理想的目的基因片段.结论:直接针对秀丽线虫进行PCR能够实现基因组DNA的快速扩增和鉴定,在保证反应特异性的同时,还能显著提高PCR反应的灵敏度,为秀丽线虫基因组的快速鉴定提供了一种便捷方法.
目的:直接針對秀麗線蟲進行PCR反應,以便快速擴增基因組DNA,從而提高釣取目的基因和鑒定基因組是否髮生突變的效率.方法:根據生物信息學分析,針對不同基因設計單重或多重PCR引物;在不含砌DNA聚閤酶的PCR反應體繫中加入蛋白酶K消化秀麗線蟲染色體中的組蛋白,然後加入Taq酶,直接針對野生型或突變型秀麗線蟲箇體進行PCR反應,無鬚提前製備基因組DNA.結果:用該方法能直接從秀麗線蟲體內的基因組DNA中擴增齣目的基因片段,與常規預先製備基因組DNA為模闆的擴增產物條帶位置一緻,且特異性更高.同時,針對不同基因的多重PCR亦能擴增齣理想的目的基因片段.結論:直接針對秀麗線蟲進行PCR能夠實現基因組DNA的快速擴增和鑒定,在保證反應特異性的同時,還能顯著提高PCR反應的靈敏度,為秀麗線蟲基因組的快速鑒定提供瞭一種便捷方法.
목적:직접침대수려선충진행PCR반응,이편쾌속확증기인조DNA,종이제고조취목적기인화감정기인조시부발생돌변적효솔.방법:근거생물신식학분석,침대불동기인설계단중혹다중PCR인물;재불함체DNA취합매적PCR반응체계중가입단백매K소화수려선충염색체중적조단백,연후가입Taq매,직접침대야생형혹돌변형수려선충개체진행PCR반응,무수제전제비기인조DNA.결과:용해방법능직접종수려선충체내적기인조DNA중확증출목적기인편단,여상규예선제비기인조DNA위모판적확증산물조대위치일치,차특이성경고.동시,침대불동기인적다중PCR역능확증출이상적목적기인편단.결론:직접침대수려선충진행PCR능구실현기인조DNA적쾌속확증화감정,재보증반응특이성적동시,환능현저제고PCR반응적령민도,위수려선충기인조적쾌속감정제공료일충편첩방법.
