四川师范大学学报（自然科学版）
四川師範大學學報（自然科學版）
사천사범대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SICHUAN NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2011年
5期
719-723
,共5页
胡浩%王茂华%刘绵学%杨毅
鬍浩%王茂華%劉綿學%楊毅
호호%왕무화%류면학%양의
FAE1启动子%瞬时表达%荧光素酶
FAE1啟動子%瞬時錶達%熒光素酶
FAE1계동자%순시표체%형광소매
油菜脂肪酸延长酶基因FAE1是广泛存在于植物中并定位于内质网上的一种能催化脂肪酸碳链延长的酮脂酰CoA合成酶,根据GenBank上已知的植物FAE1基因启动子序列设计引物,以从甘蓝型油菜(Braccica napus.L)叶片中提取的总DNA为模板,进行PCR扩增,获得了1 328bp的片段.回收该片段,并连接到pMD18-T载体测序.序列在NCBI进行blast比对,同源性为99.78％,说明该片段与植物中已知的FAE1基因的启动子序列有极高的相似性.将该片段替换掉改造后的pBI221上面的35S启动子从而构建了原生质体瞬时表达载体.然后通过PEG介导的方式将含有FAE1启动子驱动的荧光素酶报告基因(LUC)表达载体导人油菜原生质体中,研究报告基因表达量,证明出脱落酸(ABA)影响了报告基因的表达,随着ABA浓度的不断增加,LUC的表达量呈现逐步下降的趋势.
油菜脂肪痠延長酶基因FAE1是廣汎存在于植物中併定位于內質網上的一種能催化脂肪痠碳鏈延長的酮脂酰CoA閤成酶,根據GenBank上已知的植物FAE1基因啟動子序列設計引物,以從甘藍型油菜(Braccica napus.L)葉片中提取的總DNA為模闆,進行PCR擴增,穫得瞭1 328bp的片段.迴收該片段,併連接到pMD18-T載體測序.序列在NCBI進行blast比對,同源性為99.78％,說明該片段與植物中已知的FAE1基因的啟動子序列有極高的相似性.將該片段替換掉改造後的pBI221上麵的35S啟動子從而構建瞭原生質體瞬時錶達載體.然後通過PEG介導的方式將含有FAE1啟動子驅動的熒光素酶報告基因(LUC)錶達載體導人油菜原生質體中,研究報告基因錶達量,證明齣脫落痠(ABA)影響瞭報告基因的錶達,隨著ABA濃度的不斷增加,LUC的錶達量呈現逐步下降的趨勢.
유채지방산연장매기인FAE1시엄범존재우식물중병정위우내질망상적일충능최화지방산탄련연장적동지선CoA합성매,근거GenBank상이지적식물FAE1기인계동자서렬설계인물,이종감람형유채(Braccica napus.L)협편중제취적총DNA위모판,진행PCR확증,획득료1 328bp적편단.회수해편단,병련접도pMD18-T재체측서.서렬재NCBI진행blast비대,동원성위99.78％,설명해편단여식물중이지적FAE1기인적계동자서렬유겁고적상사성.장해편단체환도개조후적pBI221상면적35S계동자종이구건료원생질체순시표체재체.연후통과PEG개도적방식장함유FAE1계동자구동적형광소매보고기인(LUC)표체재체도인유채원생질체중,연구보고기인표체량,증명출탈락산(ABA)영향료보고기인적표체,수착ABA농도적불단증가,LUC적표체량정현축보하강적추세.
