中国组织化学与细胞化学杂志
中國組織化學與細胞化學雜誌
중국조직화학여세포화학잡지
CHINESE JOURNAL OF HISTOCHEMISY AND CYTOCHEMISY
2001年
2期
128-133
,共6页
满国彤%凤志慧%张同琳%周孝思
滿國彤%鳳誌慧%張同琳%週孝思
만국동%봉지혜%장동림%주효사
内皮细胞%平滑肌细胞%细胞培养
內皮細胞%平滑肌細胞%細胞培養
내피세포%평활기세포%세포배양
对培养和纯化猪主动脉内皮细胞、人脐静脉内皮细胞、猪和鼠主动脉平滑肌细胞的方法进行改进.对其鉴定方法进行了讨论.用胶原酶或胰酶消化法,或机械法分别从猪主动脉、人脐静脉、鼠主动脉获得内皮细胞和平滑肌细胞进行培养,用光学相差显微镜、免疫组化的方法进行鉴定.结果显示,相差显微镜观察:人脐静脉内皮细胞接种后2~3小时贴壁,继而铺开生长.在视野内形成散在细胞团.细胞呈铺路石样排列的单层.随着传代次数增多,可见核分裂、双核及多核.猪血管内皮细胞呈鹅卵石样,多角形,生长分裂旺盛时可见两个或多个核.猪和鼠的平滑肌细胞在相差显微镜下外观为长梭形,细胞生长致密时排列成束,相互平行,并且重叠生长,表现为典型的"波峰”与"浪谷”状.猪血管内皮细胞DiI-Ac-LDL染色,在荧光显微镜下显示特征性的黄绿色荧光.人Ⅷ因子抗原免疫组化检测人脐静脉内皮细胞,显微镜下可见核周胞浆呈现阳性反应.免疫组织化学法进行平滑肌细胞α-肌动蛋白染色,显微镜下见细胞浆内着色.本文介绍的培养及纯化猪血管内皮细胞、猪平滑肌细胞、鼠平滑肌细胞的方法简便易行.
對培養和純化豬主動脈內皮細胞、人臍靜脈內皮細胞、豬和鼠主動脈平滑肌細胞的方法進行改進.對其鑒定方法進行瞭討論.用膠原酶或胰酶消化法,或機械法分彆從豬主動脈、人臍靜脈、鼠主動脈穫得內皮細胞和平滑肌細胞進行培養,用光學相差顯微鏡、免疫組化的方法進行鑒定.結果顯示,相差顯微鏡觀察:人臍靜脈內皮細胞接種後2~3小時貼壁,繼而鋪開生長.在視野內形成散在細胞糰.細胞呈鋪路石樣排列的單層.隨著傳代次數增多,可見覈分裂、雙覈及多覈.豬血管內皮細胞呈鵝卵石樣,多角形,生長分裂旺盛時可見兩箇或多箇覈.豬和鼠的平滑肌細胞在相差顯微鏡下外觀為長梭形,細胞生長緻密時排列成束,相互平行,併且重疊生長,錶現為典型的"波峰”與"浪穀”狀.豬血管內皮細胞DiI-Ac-LDL染色,在熒光顯微鏡下顯示特徵性的黃綠色熒光.人Ⅷ因子抗原免疫組化檢測人臍靜脈內皮細胞,顯微鏡下可見覈週胞漿呈現暘性反應.免疫組織化學法進行平滑肌細胞α-肌動蛋白染色,顯微鏡下見細胞漿內著色.本文介紹的培養及純化豬血管內皮細胞、豬平滑肌細胞、鼠平滑肌細胞的方法簡便易行.
대배양화순화저주동맥내피세포、인제정맥내피세포、저화서주동맥평활기세포적방법진행개진.대기감정방법진행료토론.용효원매혹이매소화법,혹궤계법분별종저주동맥、인제정맥、서주동맥획득내피세포화평활기세포진행배양,용광학상차현미경、면역조화적방법진행감정.결과현시,상차현미경관찰:인제정맥내피세포접충후2~3소시첩벽,계이포개생장.재시야내형성산재세포단.세포정포로석양배렬적단층.수착전대차수증다,가견핵분렬、쌍핵급다핵.저혈관내피세포정아란석양,다각형,생장분렬왕성시가견량개혹다개핵.저화서적평활기세포재상차현미경하외관위장사형,세포생장치밀시배렬성속,상호평행,병차중첩생장,표현위전형적"파봉”여"랑곡”상.저혈관내피세포DiI-Ac-LDL염색,재형광현미경하현시특정성적황록색형광.인Ⅷ인자항원면역조화검측인제정맥내피세포,현미경하가견핵주포장정현양성반응.면역조직화학법진행평활기세포α-기동단백염색,현미경하견세포장내착색.본문개소적배양급순화저혈관내피세포、저평활기세포、서평활기세포적방법간편역행.