福建农林大学学报（自然科学版）
福建農林大學學報（自然科學版）
복건농림대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF FUJIAN AGRICULTURE AND FORESTRY UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2006年
3期
292-297
,共6页
黄天培%杨梅%姚帆%黄张敏%俞晓敏%黄志鹏%黄必旺
黃天培%楊梅%姚帆%黃張敏%俞曉敏%黃誌鵬%黃必旺
황천배%양매%요범%황장민%유효민%황지붕%황필왕
蜡质芽孢杆菌(Bc)%aiiA%基因克隆%序列分析%生物信息学%系统发育树%融合蛋白
蠟質芽孢桿菌(Bc)%aiiA%基因剋隆%序列分析%生物信息學%繫統髮育樹%融閤蛋白
사질아포간균(Bc)%aiiA%기인극륭%서렬분석%생물신식학%계통발육수%융합단백
设计一对可扩增aiiA基因完整的开放阅读框的简并引物对aiiA1和aiiA2,通过PCR技术对3株蜡质芽孢杆菌(Bc)的aiiA基因进行检测.结果表明,它们均含有aiiA基因.利用pMD18-T克隆载体直接从GP7菌株的PCR产物中克隆了aiiA基因.测序结果表明,该基因(GenBank登录号:AY943831)由753个碱基组成,编码含有250个氨基酸残基的蛋白质.该蛋白质推测的分子质量为28 ku,等电点约4. 235.核苷酸序列的BLAST分析结果表明,与之同源性较高的基因均为Bc组aiiA基因(87%-99%).在氨基酸序列多重比较的基础上,应用PHYLIP软件构建了AiiA蛋白的系统发育树.此外,利用原核融合表达载体pMXB10初步研究了AiiA、几丁质结合蛋白(CBD)及Intein融合蛋白诱导表达的情况.
設計一對可擴增aiiA基因完整的開放閱讀框的簡併引物對aiiA1和aiiA2,通過PCR技術對3株蠟質芽孢桿菌(Bc)的aiiA基因進行檢測.結果錶明,它們均含有aiiA基因.利用pMD18-T剋隆載體直接從GP7菌株的PCR產物中剋隆瞭aiiA基因.測序結果錶明,該基因(GenBank登錄號:AY943831)由753箇堿基組成,編碼含有250箇氨基痠殘基的蛋白質.該蛋白質推測的分子質量為28 ku,等電點約4. 235.覈苷痠序列的BLAST分析結果錶明,與之同源性較高的基因均為Bc組aiiA基因(87%-99%).在氨基痠序列多重比較的基礎上,應用PHYLIP軟件構建瞭AiiA蛋白的繫統髮育樹.此外,利用原覈融閤錶達載體pMXB10初步研究瞭AiiA、幾丁質結閤蛋白(CBD)及Intein融閤蛋白誘導錶達的情況.
설계일대가확증aiiA기인완정적개방열독광적간병인물대aiiA1화aiiA2,통과PCR기술대3주사질아포간균(Bc)적aiiA기인진행검측.결과표명,타문균함유aiiA기인.이용pMD18-T극륭재체직접종GP7균주적PCR산물중극륭료aiiA기인.측서결과표명,해기인(GenBank등록호:AY943831)유753개감기조성,편마함유250개안기산잔기적단백질.해단백질추측적분자질량위28 ku,등전점약4. 235.핵감산서렬적BLAST분석결과표명,여지동원성교고적기인균위Bc조aiiA기인(87%-99%).재안기산서렬다중비교적기출상,응용PHYLIP연건구건료AiiA단백적계통발육수.차외,이용원핵융합표체재체pMXB10초보연구료AiiA、궤정질결합단백(CBD)급Intein융합단백유도표체적정황.
