人DJ-1蛋白在NIH3T3细胞中的表达与定位
인DJ-1단백재NIH3T3세포중적표체여정위
Location and Translocation of Human DJ-1 Protein in Eukaryotic Cell
  • 万方数据
    中国生物化学与分子生物学报 중국생물화학여분자생물학보
    CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
    2006年 7期 530-534 ,共5页

    唐靖%刘靖华%蓝兴国%李志杰%刘亚伟%赵明哲%邓鹏%姜勇

    당정%류정화%람흥국%리지걸%류아위%조명철%산붕%강용

    DJ-1蛋白%增强型绿色荧光蛋白%双氧水%血清%转染 DJ-1蛋白%增彊型綠色熒光蛋白%雙氧水%血清%轉染
    DJ-1단백%증강형록색형광단백%쌍양수%혈청%전염
    采用增强型绿色荧光蛋白(EGFP)示踪的方法,研究人DJ-1蛋白在真核细胞中的定位及其对刺激的反应.将克隆在pGEX-KG上的DJ-1亚克隆到载体pEGFP-C2上,对阳性克隆进行PCR、酶切和测序鉴定,用脂质体转染NIH3T3细胞;并用荧光显微镜观察pEGFP-DJ-1在细胞内的定位以及在血清刺激时的移位;探讨在氧化应激时DJ-1对细胞的保护作用,以及其在细胞内定位的变化.重组质粒在NIH3T3细胞中得到高效表达,绿色荧光弥散分布于胞质、胞核中,但以胞质居多;血清刺激后,细胞中的绿色荧光从胞质移位到胞核;在200～600 μmol/L H2O2刺激下,DJ-1能有效保护细胞抵抗氧化应激,并且也能从胞质移位到胞核.上述研究结果为进一步研究DJ-1蛋白的功能提供了一个重要依据.
    채용증강형록색형광단백(EGFP)시종적방법,연구인DJ-1단백재진핵세포중적정위급기대자격적반응.장극륭재pGEX-KG상적DJ-1아극륭도재체pEGFP-C2상,대양성극륭진행PCR、매절화측서감정,용지질체전염NIH3T3세포;병용형광현미경관찰pEGFP-DJ-1재세포내적정위이급재혈청자격시적이위;탐토재양화응격시DJ-1대세포적보호작용,이급기재세포내정위적변화.중조질립재NIH3T3세포중득도고효표체,록색형광미산분포우포질、포핵중,단이포질거다;혈청자격후,세포중적록색형광종포질이위도포핵;재200～600 μmol/L H2O2자격하,DJ-1능유효보호세포저항양화응격,병차야능종포질이위도포핵.상술연구결과위진일보연구DJ-1단백적공능제공료일개중요의거.
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