CAJ | 학술논문

目的:建立人食管癌顺铂耐药细胞系及稳定高表达人野生型DNA聚合酶beta(polβ)的食管癌细胞系,分析polβ高表达与食管癌细胞耐药的相关性.方法:顺铂(cDDP)中等浓度、间歇作用法历时9 mo建立耐药细胞系Ec9706/cDDP;同时脂质体转染法将人野生型polβ重组绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-AC3转染入Ec9706细胞,经G418筛选得到稳定转染细胞系.荧光显微镜观察转染效果,普通倒置显微镜观察细胞形态变化.RT-PCR方法分别检测耐药细胞与转染细胞中polβmRNA的表达水平,MTT法检测各组细胞对cDDP的敏感性.结果:荧光显微镜下转染细胞荧光强,转染效率高,倒置显微镜下耐药细胞与转染前后细胞形态无明显改变.RT-PCR结果表明耐药细胞Ec9706/cDDP中polβ表达较亲本细胞增加,转染细胞的polβ表达较空载体转染细胞、对照细胞也增加.Ec9706/cDDP细胞耐药指数为15.70;转染后细胞对cDDP的敏感性降低,耐药指数为1.78.结论:成功建立了耐药细胞系Ec9706/cDDP与稳定高表达人野生型polβ的Ec9706细胞系,polβ的高表达可引起耐药性的产生,耐药细胞中polβ的表达也增高.polβ的表达与食管癌细胞的耐药性有一定相关性.
목적:건립인식관암순박내약세포계급은정고표체인야생형DNA취합매beta(polβ)적식관암세포계,분석polβ고표체여식관암세포내약적상관성.방법:순박(cDDP)중등농도、간헐작용법력시9 mo건립내약세포계Ec9706/cDDP;동시지질체전염법장인야생형polβ중조록색형광단백표체재체pEGFP-AC3전염입Ec9706세포,경G418사선득도은정전염세포계.형광현미경관찰전염효과,보통도치현미경관찰세포형태변화.RT-PCR방법분별검측내약세포여전염세포중polβmRNA적표체수평,MTT법검측각조세포대cDDP적민감성.결과:형광현미경하전염세포형광강,전염효솔고,도치현미경하내약세포여전염전후세포형태무명현개변.RT-PCR결과표명내약세포Ec9706/cDDP중polβ표체교친본세포증가,전염세포적polβ표체교공재체전염세포、대조세포야증가.Ec9706/cDDP세포내약지수위15.70;전염후세포대cDDP적민감성강저,내약지수위1.78.결론:성공건립료내약세포계Ec9706/cDDP여은정고표체인야생형polβ적Ec9706세포계,polβ적고표체가인기내약성적산생,내약세포중polβ적표체야증고.polβ적표체여식관암세포적내약성유일정상관성.