CAJ | 학술논문

FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)是一种酪氨酸激酶受体,在大多数急性髓系白血病(AML)患者中持续激活,与患者预后差密切相关.为探讨3种FLT3靶向短发夹状干扰RNA(shRNA)对急性髓系白血病细胞株THP-1的沉默效应,设计和体外转录合成3个FLT3靶向shRNA(shRNA1、shRNA2、shRNA3),体外转染THP-1细胞;以RT-PCR法检测FLT3 mRNA水平表达,用流式细胞术、免疫荧光测定法检测FLT3蛋白的表达.结果显示:shRNA1、shRNA3可显著下调FLT3 mRNA的表达,其中shRNA1的抑制作用较强.25 nmol/L shRNA1转染48小时对FLT3 mRNA的抑制率是(72.95±2.07)%,作用可达72小时.5 nmol/L及以上浓度的shRNA1对FLT3 mRNA表达有下调作用,作用存在量-效关系.15 nmol/L shRNA1的抑制率是(67.53±0.66)%.FLT3蛋白位于细胞膜上,shRNA1对其有较强的抑制作用,转染72小时蛋白抑制率达(79.67±0.66)%.结论:FLT3-shRNA1具有较好的FLT3基因靶向抑制作用,可作为进一步研究该基因作用机制及靶向治疗可能性的工具.
FMS양락안산격매3(FLT3)시일충락안산격매수체,재대다수급성수계백혈병(AML)환자중지속격활,여환자예후차밀절상관.위탐토3충FLT3파향단발협상간우RNA(shRNA)대급성수계백혈병세포주THP-1적침묵효응,설계화체외전록합성3개FLT3파향shRNA(shRNA1、shRNA2、shRNA3),체외전염THP-1세포;이RT-PCR법검측FLT3 mRNA수평표체,용류식세포술、면역형광측정법검측FLT3단백적표체.결과현시:shRNA1、shRNA3가현저하조FLT3 mRNA적표체,기중shRNA1적억제작용교강.25 nmol/L shRNA1전염48소시대FLT3 mRNA적억제솔시(72.95±2.07)%,작용가체72소시.5 nmol/L급이상농도적shRNA1대FLT3 mRNA표체유하조작용,작용존재량-효관계.15 nmol/L shRNA1적억제솔시(67.53±0.66)%.FLT3단백위우세포막상,shRNA1대기유교강적억제작용,전염72소시단백억제솔체(79.67±0.66)%.결론:FLT3-shRNA1구유교호적FLT3기인파향억제작용,가작위진일보연구해기인작용궤제급파향치료가능성적공구.