微生物学杂志
微生物學雜誌
미생물학잡지
JOURNAL OF MICROBIOLOGY
2009年
1期
32-35
,共4页
郑立运%周玉冰%杨小昂%江金花%王宁%张艳%王庆端
鄭立運%週玉冰%楊小昂%江金花%王寧%張豔%王慶耑
정립운%주옥빙%양소앙%강금화%왕저%장염%왕경단
乙型肝炎病毒%拉米夫定耐药%YIDD变异%真核表达载体
乙型肝炎病毒%拉米伕定耐藥%YIDD變異%真覈錶達載體
을형간염병독%랍미부정내약%YIDD변이%진핵표체재체
构建HBV YIDD拉米夫定耐药株1.3倍全基因真核表达载体,为进一步探讨乙肝病毒变异株的生物学特性及筛选抗病毒药物奠定基础.参考GenBank HBV序列设计并合成一系列引物,以临床证实为拉米夫定耐药的病人HBV DNA为模板,通过PCR扩增得到HBV全基因组并克隆至pGEM-T Easy载体中,经测序证实聚合酶基因存在YIDD变异,然后以该病人的HBV全基因组为模板构建 1.3 倍全基因HBV-YIDD变异真核表达载体pcDNA3.1(+)-1.3HBV.通过PCR扩增,酶切及测序证明pcDNA3.1(+)-1.3 HBV表达载体构建成功,该表达载体的构建为后期建立稳定表达HBV-YIDD变异的细胞模型提供材料.
構建HBV YIDD拉米伕定耐藥株1.3倍全基因真覈錶達載體,為進一步探討乙肝病毒變異株的生物學特性及篩選抗病毒藥物奠定基礎.參攷GenBank HBV序列設計併閤成一繫列引物,以臨床證實為拉米伕定耐藥的病人HBV DNA為模闆,通過PCR擴增得到HBV全基因組併剋隆至pGEM-T Easy載體中,經測序證實聚閤酶基因存在YIDD變異,然後以該病人的HBV全基因組為模闆構建 1.3 倍全基因HBV-YIDD變異真覈錶達載體pcDNA3.1(+)-1.3HBV.通過PCR擴增,酶切及測序證明pcDNA3.1(+)-1.3 HBV錶達載體構建成功,該錶達載體的構建為後期建立穩定錶達HBV-YIDD變異的細胞模型提供材料.
구건HBV YIDD랍미부정내약주1.3배전기인진핵표체재체,위진일보탐토을간병독변이주적생물학특성급사선항병독약물전정기출.삼고GenBank HBV서렬설계병합성일계렬인물,이림상증실위랍미부정내약적병인HBV DNA위모판,통과PCR확증득도HBV전기인조병극륭지pGEM-T Easy재체중,경측서증실취합매기인존재YIDD변이,연후이해병인적HBV전기인조위모판구건 1.3 배전기인HBV-YIDD변이진핵표체재체pcDNA3.1(+)-1.3HBV.통과PCR확증,매절급측서증명pcDNA3.1(+)-1.3 HBV표체재체구건성공,해표체재체적구건위후기건립은정표체HBV-YIDD변이적세포모형제공재료.
