CAJ | 학술논문

为建立鹿源牛病毒性腹泻-粘膜病病毒(BVDV)检测方法,本研究制备了抗鹿源BVDV特异性单克隆抗体(MAb).用纯化的BVDV免疫BALB/C小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经3次有限稀释法克隆和间接ELISA法筛选,获得2株稳定分泌MAb的杂交瘤细胞株2A3和4B12.通过间接ELISA检测,MAb效价为:上清液及腹水分别为1:512、1:640和1:12800、1:16000;MAb的亚类鉴定结果表明,2株杂交瘤细胞分泌的抗体亚类均为IgG1亚类;经ELISA测定,2A3和4812与BVDV C24V株、HCV、BDV、PRV均不发生交叉反应,但与BVDV CCSYD株发生交叉反应;IFA试验结果显示,4B12和2A3与接种BVDV N71株病毒液的细胞反应产生较强的特异荧光;抗原识别位点分析结果表明,2A3和4B12两株MAb所识别的抗原位点相同.这两株MAb的获得为鹿BVDV的检测方法的建立奠定良好的基础.
위건립록원우병독성복사-점막병병독(BVDV)검측방법,본연구제비료항록원BVDV특이성단극륭항체(MAb).용순화적BVDV면역BALB/C소서,취기비세포여SP2/0골수류세포진행융합,경3차유한희석법극륭화간접ELISA법사선,획득2주은정분비MAb적잡교류세포주2A3화4B12.통과간접ELISA검측,MAb효개위:상청액급복수분별위1:512、1:640화1:12800、1:16000;MAb적아류감정결과표명,2주잡교류세포분비적항체아류균위IgG1아류;경ELISA측정,2A3화4812여BVDV C24V주、HCV、BDV、PRV균불발생교차반응,단여BVDV CCSYD주발생교차반응;IFA시험결과현시,4B12화2A3여접충BVDV N71주병독액적세포반응산생교강적특이형광;항원식별위점분석결과표명,2A3화4B12량주MAb소식별적항원위점상동.저량주MAb적획득위록BVDV적검측방법적건립전정량호적기출.