中国医药生物技术
中國醫藥生物技術
중국의약생물기술
CHINESE MEDICINAL BIOTECHNOLOGY
2011年
1期
24-28
,共5页
马汝海%王天骄%潘忠诚%何群
馬汝海%王天驕%潘忠誠%何群
마여해%왕천교%반충성%하군
细胞膜%凝集素类%动物实验
細胞膜%凝集素類%動物實驗
세포막%응집소류%동물실험
目的 应用凝集素芯片检测小鼠和兔不同组织细胞膜表面的糖链类型,探求不同物种间相同组织细胞膜表面糖复合物在种群免疫和细胞功能中的作用.方法 选择22种凝集素,利用生物芯片点样仪制各芯片,选用牛血清白蛋白(BSA)为阴性质控,马铃薯凝集素(STL)为阳性质控.分别用胶原酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ消化小鼠和兔的肾、脾、肝组织,制备细胞悬液,并加入吖啶橙荧光标记细胞.将细胞悬液分别滴加至凝集素芯片中,利用凝集素与糖链的特异亲和性捕获细胞,激光扫描仪检测芯片中各凝集素位点的荧光信号强度,行常规HE染色后于荧光显微镜下观察各凝集素位点所捕获的细胞形态,并分析不同胶原酶消化对检测结果的影响.结果 小鼠和兔相同组织的细胞膜表面糖链类型基本相同,仅个别位点略有不同.在GNA、LTL、HHL,、NPL位点,兔脾细胞均为阴性,小鼠脾细胞均为阳性.在BPL、WFA位点,兔肾细胞均为阴性,小鼠肾细胞均为阳性;在MAL-I位点,兔肾细胞为阳性,小鼠肾细胞为阴性.MPL、WBA、LTL、SBA、BPL、WFA、MAL-I、AAL、BCL位点,兔肝细胞均为阳性,小鼠肝细胞均为阴性;在NPL位点,小鼠肝细胞为阳性,兔肝细胞为阴性.DSL、STL位点,小鼠和兔各组织细胞检测结果均为阳性;在EEL,、DBA位点,小鼠和兔各组织细胞检测结果均为阴性.在GNA位点,兔脾组织经胶原酶Ⅱ消化后可见极少量细胞,经其他2种胶原酶消化后则未见捕获细胞.兔肾组织以及小鼠的脾和肾组织经3种胶原酶消化后,检测结果无明显差异.在BCL位点,兔肝组织经胶原酶Ⅳ消化后捕获细胞最多,其次为胶原酶Ⅱ,胶原酶Ⅰ最少.结论 通过制备的凝集素芯片成功检测了小鼠和兔不同组织细胞膜表面的糖链特异性.小鼠和兔相同组织的细胞膜表面具有相同类型糖链,但不同组织之间细胞膜糖链类型也存在其特异性,这可能与组织分化及其功能密切相关.
目的 應用凝集素芯片檢測小鼠和兔不同組織細胞膜錶麵的糖鏈類型,探求不同物種間相同組織細胞膜錶麵糖複閤物在種群免疫和細胞功能中的作用.方法 選擇22種凝集素,利用生物芯片點樣儀製各芯片,選用牛血清白蛋白(BSA)為陰性質控,馬鈴藷凝集素(STL)為暘性質控.分彆用膠原酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ消化小鼠和兔的腎、脾、肝組織,製備細胞懸液,併加入吖啶橙熒光標記細胞.將細胞懸液分彆滴加至凝集素芯片中,利用凝集素與糖鏈的特異親和性捕穫細胞,激光掃描儀檢測芯片中各凝集素位點的熒光信號彊度,行常規HE染色後于熒光顯微鏡下觀察各凝集素位點所捕穫的細胞形態,併分析不同膠原酶消化對檢測結果的影響.結果 小鼠和兔相同組織的細胞膜錶麵糖鏈類型基本相同,僅箇彆位點略有不同.在GNA、LTL、HHL,、NPL位點,兔脾細胞均為陰性,小鼠脾細胞均為暘性.在BPL、WFA位點,兔腎細胞均為陰性,小鼠腎細胞均為暘性;在MAL-I位點,兔腎細胞為暘性,小鼠腎細胞為陰性.MPL、WBA、LTL、SBA、BPL、WFA、MAL-I、AAL、BCL位點,兔肝細胞均為暘性,小鼠肝細胞均為陰性;在NPL位點,小鼠肝細胞為暘性,兔肝細胞為陰性.DSL、STL位點,小鼠和兔各組織細胞檢測結果均為暘性;在EEL,、DBA位點,小鼠和兔各組織細胞檢測結果均為陰性.在GNA位點,兔脾組織經膠原酶Ⅱ消化後可見極少量細胞,經其他2種膠原酶消化後則未見捕穫細胞.兔腎組織以及小鼠的脾和腎組織經3種膠原酶消化後,檢測結果無明顯差異.在BCL位點,兔肝組織經膠原酶Ⅳ消化後捕穫細胞最多,其次為膠原酶Ⅱ,膠原酶Ⅰ最少.結論 通過製備的凝集素芯片成功檢測瞭小鼠和兔不同組織細胞膜錶麵的糖鏈特異性.小鼠和兔相同組織的細胞膜錶麵具有相同類型糖鏈,但不同組織之間細胞膜糖鏈類型也存在其特異性,這可能與組織分化及其功能密切相關.
목적 응용응집소심편검측소서화토불동조직세포막표면적당련류형,탐구불동물충간상동조직세포막표면당복합물재충군면역화세포공능중적작용.방법 선택22충응집소,이용생물심편점양의제각심편,선용우혈청백단백(BSA)위음성질공,마령서응집소(STL)위양성질공.분별용효원매Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ소화소서화토적신、비、간조직,제비세포현액,병가입아정등형광표기세포.장세포현액분별적가지응집소심편중,이용응집소여당련적특이친화성포획세포,격광소묘의검측심편중각응집소위점적형광신호강도,행상규HE염색후우형광현미경하관찰각응집소위점소포획적세포형태,병분석불동효원매소화대검측결과적영향.결과 소서화토상동조직적세포막표면당련류형기본상동,부개별위점략유불동.재GNA、LTL、HHL,、NPL위점,토비세포균위음성,소서비세포균위양성.재BPL、WFA위점,토신세포균위음성,소서신세포균위양성;재MAL-I위점,토신세포위양성,소서신세포위음성.MPL、WBA、LTL、SBA、BPL、WFA、MAL-I、AAL、BCL위점,토간세포균위양성,소서간세포균위음성;재NPL위점,소서간세포위양성,토간세포위음성.DSL、STL위점,소서화토각조직세포검측결과균위양성;재EEL,、DBA위점,소서화토각조직세포검측결과균위음성.재GNA위점,토비조직경효원매Ⅱ소화후가견겁소량세포,경기타2충효원매소화후칙미견포획세포.토신조직이급소서적비화신조직경3충효원매소화후,검측결과무명현차이.재BCL위점,토간조직경효원매Ⅳ소화후포획세포최다,기차위효원매Ⅱ,효원매Ⅰ최소.결론 통과제비적응집소심편성공검측료소서화토불동조직세포막표면적당련특이성.소서화토상동조직적세포막표면구유상동류형당련,단불동조직지간세포막당련류형야존재기특이성,저가능여조직분화급기공능밀절상관.
