南京农业大学学报
南京農業大學學報
남경농업대학학보
JOURNAL OF NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY
2011年
6期
89-94
,共6页
曾后清%刘赣%朱毅勇%徐国华%沈其荣
曾後清%劉贛%硃毅勇%徐國華%瀋其榮
증후청%류공%주의용%서국화%침기영
拟南芥%硝酸盐%细胞膜H+-ATPase
擬南芥%硝痠鹽%細胞膜H+-ATPase
의남개%초산염%세포막H+-ATPase
以野生型拟南芥(WT)和叶柄硝酸盐积累减少的拟南芥突变体atnar1.4为材料,研究了叶柄与叶片硝酸盐的积累及细胞膜H+-ATPase.采用两相法分离了2种材料细胞膜并测定了细胞膜H+-ATPase活性,通过RT-PCR分析了WT与atnrt1.4叶柄及叶片中各个细胞膜H+-ATPase基因的表达,并采用Western blot分析了WT与atnrt1.4叶柄及叶片细胞膜上H+-ATPase的蛋白浓度.结果显示:atnrt1.4叶柄硝酸盐积累显著低于WT叶柄,仅为WT的58.6%;atnrt1.4叶柄中细胞膜H+-ATPase基因AHA3、AHA5、AHA10和AHA11的表达比WT显著降低;atnrt1.4叶柄细胞膜H+-ATPase蛋白浓度也显著低于WT叶柄.WT叶柄硝酸盐积累显著高于叶片,相应的细胞膜H+-ATPase的水解活性也显著高于叶片.上述研究表明:atnrt1.4叶柄硝酸盐积累减少导致其细胞膜H+-ATPase活性降低;拟南芥体内硝酸盐积累差异与细胞膜H+-ATPase活性有关.
以野生型擬南芥(WT)和葉柄硝痠鹽積纍減少的擬南芥突變體atnar1.4為材料,研究瞭葉柄與葉片硝痠鹽的積纍及細胞膜H+-ATPase.採用兩相法分離瞭2種材料細胞膜併測定瞭細胞膜H+-ATPase活性,通過RT-PCR分析瞭WT與atnrt1.4葉柄及葉片中各箇細胞膜H+-ATPase基因的錶達,併採用Western blot分析瞭WT與atnrt1.4葉柄及葉片細胞膜上H+-ATPase的蛋白濃度.結果顯示:atnrt1.4葉柄硝痠鹽積纍顯著低于WT葉柄,僅為WT的58.6%;atnrt1.4葉柄中細胞膜H+-ATPase基因AHA3、AHA5、AHA10和AHA11的錶達比WT顯著降低;atnrt1.4葉柄細胞膜H+-ATPase蛋白濃度也顯著低于WT葉柄.WT葉柄硝痠鹽積纍顯著高于葉片,相應的細胞膜H+-ATPase的水解活性也顯著高于葉片.上述研究錶明:atnrt1.4葉柄硝痠鹽積纍減少導緻其細胞膜H+-ATPase活性降低;擬南芥體內硝痠鹽積纍差異與細胞膜H+-ATPase活性有關.
이야생형의남개(WT)화협병초산염적루감소적의남개돌변체atnar1.4위재료,연구료협병여협편초산염적적루급세포막H+-ATPase.채용량상법분리료2충재료세포막병측정료세포막H+-ATPase활성,통과RT-PCR분석료WT여atnrt1.4협병급협편중각개세포막H+-ATPase기인적표체,병채용Western blot분석료WT여atnrt1.4협병급협편세포막상H+-ATPase적단백농도.결과현시:atnrt1.4협병초산염적루현저저우WT협병,부위WT적58.6%;atnrt1.4협병중세포막H+-ATPase기인AHA3、AHA5、AHA10화AHA11적표체비WT현저강저;atnrt1.4협병세포막H+-ATPase단백농도야현저저우WT협병.WT협병초산염적루현저고우협편,상응적세포막H+-ATPase적수해활성야현저고우협편.상술연구표명:atnrt1.4협병초산염적루감소도치기세포막H+-ATPase활성강저;의남개체내초산염적루차이여세포막H+-ATPase활성유관.