科学通报
科學通報
과학통보
CHINESE SCIENCE BULLETIN
2004年
21期
2178-2186
,共9页
焦传珍%王在照%李富花%张成松%相建海
焦傳珍%王在照%李富花%張成鬆%相建海
초전진%왕재조%리부화%장성송%상건해
中国明对虾%HSC70%克隆%表达
中國明對蝦%HSC70%剋隆%錶達
중국명대하%HSC70%극륭%표체
根据中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis) EST序列信息设计引物, 用RT-PCR方法, 从经热休克处理的中国明对虾的肝胰腺RNA中克隆到长2090 bp的hsc70 cDNA序列, 包括长1956 bp的完整编码序列(complete CDS)及部分5′端和3′端非翻译区(5′UTR 和3′ UTR). PCR及测序结果分析显示, hsc70 cDNA的1~547 bp碱基所对应的基因组序列可能含有内含子, 548~2090 bp碱基所对应的基因组序列不含内含子. 根据编码序列推导出相应的652个氨基酸, 与其他真核生物HSP70家族成员进行同源性比较, 发现中国明对虾HSC70 与虹鳟(Oncorhynchus mykiss)HSC71, 人(Homo sapiens)HSC70, 家鼠(Mus musculus )HSP70, 烟草天蛾(Manduca sexta )HSC70的相似性分别是85.9%, 85.9%, 85.8%, 85.4%, 表现出较高的保守性. 表达分析显示, hsc70 mRNA在中国明对虾正常肝胰腺、肌肉、眼柄、血细胞、心脏、卵巢、肠和鳃等组织存在, 并呈组成性表达; 受到整体热休克后的对虾肌肉组织hsc70 mRNA水平(以β- actin mRNA水平为内标)与对照组没有显著的差异.
根據中國明對蝦(Fenneropenaeus chinensis) EST序列信息設計引物, 用RT-PCR方法, 從經熱休剋處理的中國明對蝦的肝胰腺RNA中剋隆到長2090 bp的hsc70 cDNA序列, 包括長1956 bp的完整編碼序列(complete CDS)及部分5′耑和3′耑非翻譯區(5′UTR 和3′ UTR). PCR及測序結果分析顯示, hsc70 cDNA的1~547 bp堿基所對應的基因組序列可能含有內含子, 548~2090 bp堿基所對應的基因組序列不含內含子. 根據編碼序列推導齣相應的652箇氨基痠, 與其他真覈生物HSP70傢族成員進行同源性比較, 髮現中國明對蝦HSC70 與虹鱒(Oncorhynchus mykiss)HSC71, 人(Homo sapiens)HSC70, 傢鼠(Mus musculus )HSP70, 煙草天蛾(Manduca sexta )HSC70的相似性分彆是85.9%, 85.9%, 85.8%, 85.4%, 錶現齣較高的保守性. 錶達分析顯示, hsc70 mRNA在中國明對蝦正常肝胰腺、肌肉、眼柄、血細胞、心髒、卵巢、腸和鰓等組織存在, 併呈組成性錶達; 受到整體熱休剋後的對蝦肌肉組織hsc70 mRNA水平(以β- actin mRNA水平為內標)與對照組沒有顯著的差異.
근거중국명대하(Fenneropenaeus chinensis) EST서렬신식설계인물, 용RT-PCR방법, 종경열휴극처리적중국명대하적간이선RNA중극륭도장2090 bp적hsc70 cDNA서렬, 포괄장1956 bp적완정편마서렬(complete CDS)급부분5′단화3′단비번역구(5′UTR 화3′ UTR). PCR급측서결과분석현시, hsc70 cDNA적1~547 bp감기소대응적기인조서렬가능함유내함자, 548~2090 bp감기소대응적기인조서렬불함내함자. 근거편마서렬추도출상응적652개안기산, 여기타진핵생물HSP70가족성원진행동원성비교, 발현중국명대하HSC70 여홍준(Oncorhynchus mykiss)HSC71, 인(Homo sapiens)HSC70, 가서(Mus musculus )HSP70, 연초천아(Manduca sexta )HSC70적상사성분별시85.9%, 85.9%, 85.8%, 85.4%, 표현출교고적보수성. 표체분석현시, hsc70 mRNA재중국명대하정상간이선、기육、안병、혈세포、심장、란소、장화새등조직존재, 병정조성성표체; 수도정체열휴극후적대하기육조직hsc70 mRNA수평(이β- actin mRNA수평위내표)여대조조몰유현저적차이.