CAJ | 학술논문

背景与目的:SMYD3(SET and MYND domain-containing protein 3)基因的表达蛋白是一种组蛋白甲基转移酶,参与肿瘤细胞增殖与凋亡的调控.本研究旨在探讨利用RNA干扰(RNA interference,RNAi)抑制SMYD3基因表达对肝癌细胞增殖与凋亡的影响.方法:RT-PCR、免疫组织化学法分别检测SMYD3在肝癌细胞和肝癌组织中的表达.构建小发夹状RNA(small hairpin RNA,shRNA)干扰质粒Pgenesil-1-s1、Pgenesil-1-s2及无干扰效应质粒Pgenesil-1-hk并转染入肝癌细胞HepG2,阻抑其表达SMYD3,以空质粒Pgenesil-1转染组为对照.Western blot检测阻抑效应;MTT检测细胞增殖抑制率,流式细胞术及TUNEL检测细胞凋亡.结果:SMYD3在肝癌组织和多种肝癌细胞中表达明显增强.shRNA转染HepG2细胞后:SMYD3蛋白表达下调75%～85%;细胞增殖明显受抑制,抑制率高达60.95%～72.14%;流式细胞术结果显示Pgenesil-l-s1组HepG2细胞凋亡率(17.68±2.36)%、Pgenesil-1-s2组(19.07±1.78)%,均显著高于Pgenesil-1-hk组[(1.44±0.28)%]及Pgenesil-1组[(0.47±0.12)%](P＜0.01);TUNEL检测的凋亡指数结果与流式细胞术检测结果类似.结论:SMYD3高表达于多种肝癌细胞及肝癌组织;RNAi能特异性下调SMYD3的表达,抑制肝癌细胞增殖并促进细胞凋亡,提示其可能为治疗肝癌提供新的途径.
배경여목적:SMYD3(SET and MYND domain-containing protein 3)기인적표체단백시일충조단백갑기전이매,삼여종류세포증식여조망적조공.본연구지재탐토이용RNA간우(RNA interference,RNAi)억제SMYD3기인표체대간암세포증식여조망적영향.방법:RT-PCR、면역조직화학법분별검측SMYD3재간암세포화간암조직중적표체.구건소발협상RNA(small hairpin RNA,shRNA)간우질립Pgenesil-1-s1、Pgenesil-1-s2급무간우효응질립Pgenesil-1-hk병전염입간암세포HepG2,조억기표체SMYD3,이공질립Pgenesil-1전염조위대조.Western blot검측조억효응;MTT검측세포증식억제솔,류식세포술급TUNEL검측세포조망.결과:SMYD3재간암조직화다충간암세포중표체명현증강.shRNA전염HepG2세포후:SMYD3단백표체하조75%～85%;세포증식명현수억제,억제솔고체60.95%～72.14%;류식세포술결과현시Pgenesil-l-s1조HepG2세포조망솔(17.68±2.36)%、Pgenesil-1-s2조(19.07±1.78)%,균현저고우Pgenesil-1-hk조[(1.44±0.28)%]급Pgenesil-1조[(0.47±0.12)%](P＜0.01);TUNEL검측적조망지수결과여류식세포술검측결과유사.결론:SMYD3고표체우다충간암세포급간암조직;RNAi능특이성하조SMYD3적표체,억제간암세포증식병촉진세포조망,제시기가능위치료간암제공신적도경.