现代肿瘤医学
現代腫瘤醫學
현대종류의학
JOURNAL OF MODERN ONCOLOGY
2007年
8期
1071-1073
,共3页
shRNA%RNAi%突变型%磷酸酶2Aα催化亚基
shRNA%RNAi%突變型%燐痠酶2Aα催化亞基
shRNA%RNAi%돌변형%린산매2Aα최화아기
目的:利用RNA干扰(RNAi)技术,研究突变型蛋白磷酸酶2A(PP2A)α催化亚基编码基因的小发夹RNA(shRNA)对人肺癌GLC-82细胞的影响.方法:根据靶基因的不同区域设计4组shRNA,采用体外转录法合成,利用阳离子脂质体转染入GLC-82细胞,孵育48小时后,观察细胞形态学改变,MTT法检测细胞的存活率,免疫印迹法检测蛋白质的表达.结果:与空白对照相比,4组shRNA作用不尽相同,其中一组shRNA可以明显抑制细胞的增殖,出现部分细胞脱落死亡,并且抑制GLC-82细胞目的蛋白的表达.结论:成功筛选出一段能特异而高效地抑制突变型PP2A α催化亚基基因表达的shRNA,为进一步研究该基因的功能和作用机制提供了新的手段.另外,应用RNA干扰技术可抑制突变型PP2A α催化亚基编码基因在人肺癌GLC-82细胞中的表达,有望成为肺癌基因治疗新的研究线索.
目的:利用RNA榦擾(RNAi)技術,研究突變型蛋白燐痠酶2A(PP2A)α催化亞基編碼基因的小髮夾RNA(shRNA)對人肺癌GLC-82細胞的影響.方法:根據靶基因的不同區域設計4組shRNA,採用體外轉錄法閤成,利用暘離子脂質體轉染入GLC-82細胞,孵育48小時後,觀察細胞形態學改變,MTT法檢測細胞的存活率,免疫印跡法檢測蛋白質的錶達.結果:與空白對照相比,4組shRNA作用不儘相同,其中一組shRNA可以明顯抑製細胞的增殖,齣現部分細胞脫落死亡,併且抑製GLC-82細胞目的蛋白的錶達.結論:成功篩選齣一段能特異而高效地抑製突變型PP2A α催化亞基基因錶達的shRNA,為進一步研究該基因的功能和作用機製提供瞭新的手段.另外,應用RNA榦擾技術可抑製突變型PP2A α催化亞基編碼基因在人肺癌GLC-82細胞中的錶達,有望成為肺癌基因治療新的研究線索.
목적:이용RNA간우(RNAi)기술,연구돌변형단백린산매2A(PP2A)α최화아기편마기인적소발협RNA(shRNA)대인폐암GLC-82세포적영향.방법:근거파기인적불동구역설계4조shRNA,채용체외전록법합성,이용양리자지질체전염입GLC-82세포,부육48소시후,관찰세포형태학개변,MTT법검측세포적존활솔,면역인적법검측단백질적표체.결과:여공백대조상비,4조shRNA작용불진상동,기중일조shRNA가이명현억제세포적증식,출현부분세포탈락사망,병차억제GLC-82세포목적단백적표체.결론:성공사선출일단능특이이고효지억제돌변형PP2A α최화아기기인표체적shRNA,위진일보연구해기인적공능화작용궤제제공료신적수단.령외,응용RNA간우기술가억제돌변형PP2A α최화아기편마기인재인폐암GLC-82세포중적표체,유망성위폐암기인치료신적연구선색.