华侨大学学报（自然科学版）
華僑大學學報（自然科學版）
화교대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF HUAQIAO UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2010年
5期
552-556
,共5页
刘嘉%贺淹才%施腾鑫%李梓君%王珍珠
劉嘉%賀淹纔%施騰鑫%李梓君%王珍珠
류가%하엄재%시등흠%리재군%왕진주
粘质沙雷氏菌%重组%几丁质酶C%分离纯化%酶学性质
粘質沙雷氏菌%重組%幾丁質酶C%分離純化%酶學性質
점질사뢰씨균%중조%궤정질매C%분리순화%매학성질
为从已构建的重组大肠杆菌pET-22b-chiC获得高纯的几丁质酶C,通过降低培养温度,提高粘质沙雷氏菌几丁质酶C的可溶性表达.表达产物经镍柱亲和层析(IMAC)和Phenyl-Sepharose疏水层析(HIC)分离纯化后,得到电泳纯的几丁质酶.酶学性质研究表明,纯化的几丁质酶C为单体蛋白,相对分子质量为51.8 ku;最适pH值为5.0,最适温度为55 ℃,在55 ℃的条件下保温4 h后仍有90%以上的酶活力.研究结果还表明,Cu2+,Hg2+,Co2+,Mg2+对酶活力均有明显抑制作用,而Fe2+,Zn2+,Sn2+,Ba2+对酶活力有一定促进作用,Mn2+对酶活力明显促进作用.
為從已構建的重組大腸桿菌pET-22b-chiC穫得高純的幾丁質酶C,通過降低培養溫度,提高粘質沙雷氏菌幾丁質酶C的可溶性錶達.錶達產物經鎳柱親和層析(IMAC)和Phenyl-Sepharose疏水層析(HIC)分離純化後,得到電泳純的幾丁質酶.酶學性質研究錶明,純化的幾丁質酶C為單體蛋白,相對分子質量為51.8 ku;最適pH值為5.0,最適溫度為55 ℃,在55 ℃的條件下保溫4 h後仍有90%以上的酶活力.研究結果還錶明,Cu2+,Hg2+,Co2+,Mg2+對酶活力均有明顯抑製作用,而Fe2+,Zn2+,Sn2+,Ba2+對酶活力有一定促進作用,Mn2+對酶活力明顯促進作用.
위종이구건적중조대장간균pET-22b-chiC획득고순적궤정질매C,통과강저배양온도,제고점질사뢰씨균궤정질매C적가용성표체.표체산물경얼주친화층석(IMAC)화Phenyl-Sepharose소수층석(HIC)분리순화후,득도전영순적궤정질매.매학성질연구표명,순화적궤정질매C위단체단백,상대분자질량위51.8 ku;최괄pH치위5.0,최괄온도위55 ℃,재55 ℃적조건하보온4 h후잉유90%이상적매활력.연구결과환표명,Cu2+,Hg2+,Co2+,Mg2+대매활력균유명현억제작용,이Fe2+,Zn2+,Sn2+,Ba2+대매활력유일정촉진작용,Mn2+대매활력명현촉진작용.
