CAJ | 학술논문

目的:构建绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记顶质体的弓形虫突变株,建立检测顶质体的简便方法.方法:扩增顶质体酰基载体蛋白(acyl carrier protein,ACP)基因并构建转染载体pHX-ACP-GFP,转入弓形虫 hxgprt -株速殖子,经霉酚酸和黄嘌呤筛选荧光突变株.激光共聚焦显微镜和蛋白质印迹技术检测突变株ACP-GFP融合蛋白的表达.结果:通过霉酚酸和黄嘌呤筛选,可以在1周内获得突变株.激光共聚焦显微镜下观察到ACP-GFP融合蛋白聚集于顶质体,用抗GFP抗体能检测出ACP的转运肽型和成熟型蛋白.结论:顶质体荧光突变株可清晰标记出顶质体的位置,借助GFP标签即可检测融合蛋白的表达.
목적:구건록색형광단백(green fluorescent protein,GFP)표기정질체적궁형충돌변주,건립검측정질체적간편방법.방법:확증정질체선기재체단백(acyl carrier protein,ACP)기인병구건전염재체pHX-ACP-GFP,전입궁형충 hxgprt -주속식자,경매분산화황표령사선형광돌변주.격광공취초현미경화단백질인적기술검측돌변주ACP-GFP융합단백적표체.결과:통과매분산화황표령사선,가이재1주내획득돌변주.격광공취초현미경하관찰도ACP-GFP융합단백취집우정질체,용항GFP항체능검측출ACP적전운태형화성숙형단백.결론:정질체형광돌변주가청석표기출정질체적위치,차조GFP표첨즉가검측융합단백적표체.