广东医学
廣東醫學
엄동의학
GUNAGDONG MEDICAL JOURNAL
2012年
20期
3046-3050
,共5页
郑艳华%丁涛%叶丹凤%王素玲%马红霞
鄭豔華%丁濤%葉丹鳳%王素玲%馬紅霞
정염화%정도%협단봉%왕소령%마홍하
雄激素%颗粒细胞%增殖%分化%分泌
雄激素%顆粒細胞%增殖%分化%分泌
웅격소%과립세포%증식%분화%분비
目的 研究高浓度雄激素环境对卵巢颗粒细胞(GC)分泌功能和增殖、分化的影响.方法 体外培养猪卵巢窦状卵泡GC,先以梯度浓度(500、250、125、62.5、31.25、15.625 μmol/L)加入丙酸睾酮,通过CCK-8法检测各纽GC相对活力,确定适合继续研究的丙酸睾酮浓度；放射免疫法检测并对比实验组(加入丙酸睾酮)和空白对照组(未加入任何物质)细胞上清液中雌二醇(E2)与孕酮(P)的含量；采用半定量RT-PCR和Western blot 分别检测两组的PCNA、FSHR、StAR mRNA与PCNA、FSHR、StAR、IGF-Ⅰ、p-ERK1/2、p-p38、Cyclin D2和CDK4蛋白表达水平.结果 实验组E2较对照组显著升高(P＜0.001),P则显著降低(P＜0.001)；GC中PCNA、StAR和FSHR mRNA表达量较对照组均明显下降(P＜0.05)；同时PCNA、FSHR、StAR、IGF-Ⅰ、p-ERK1/2与p-p38蛋白表达较对照组也明显下降(P＜0.05).结论 雄激素对卵泡发育的影响具有双重性,高浓度雄激素抑制GC分泌P的作用可能早于抑制E2的分泌；并影响ERK1/2和p38MAPK信号通路,一方面通过抑制Cyclin D2,使正常的细胞周期调控受阻而抑制细胞增殖,另一方使细胞形态和存活率失调,而负向调控细胞正常分化.
目的 研究高濃度雄激素環境對卵巢顆粒細胞(GC)分泌功能和增殖、分化的影響.方法 體外培養豬卵巢竇狀卵泡GC,先以梯度濃度(500、250、125、62.5、31.25、15.625 μmol/L)加入丙痠睪酮,通過CCK-8法檢測各紐GC相對活力,確定適閤繼續研究的丙痠睪酮濃度；放射免疫法檢測併對比實驗組(加入丙痠睪酮)和空白對照組(未加入任何物質)細胞上清液中雌二醇(E2)與孕酮(P)的含量；採用半定量RT-PCR和Western blot 分彆檢測兩組的PCNA、FSHR、StAR mRNA與PCNA、FSHR、StAR、IGF-Ⅰ、p-ERK1/2、p-p38、Cyclin D2和CDK4蛋白錶達水平.結果 實驗組E2較對照組顯著升高(P＜0.001),P則顯著降低(P＜0.001)；GC中PCNA、StAR和FSHR mRNA錶達量較對照組均明顯下降(P＜0.05)；同時PCNA、FSHR、StAR、IGF-Ⅰ、p-ERK1/2與p-p38蛋白錶達較對照組也明顯下降(P＜0.05).結論 雄激素對卵泡髮育的影響具有雙重性,高濃度雄激素抑製GC分泌P的作用可能早于抑製E2的分泌；併影響ERK1/2和p38MAPK信號通路,一方麵通過抑製Cyclin D2,使正常的細胞週期調控受阻而抑製細胞增殖,另一方使細胞形態和存活率失調,而負嚮調控細胞正常分化.
목적 연구고농도웅격소배경대란소과립세포(GC)분비공능화증식、분화적영향.방법 체외배양저란소두상란포GC,선이제도농도(500、250、125、62.5、31.25、15.625 μmol/L)가입병산고동,통과CCK-8법검측각뉴GC상대활력,학정괄합계속연구적병산고동농도；방사면역법검측병대비실험조(가입병산고동)화공백대조조(미가입임하물질)세포상청액중자이순(E2)여잉동(P)적함량；채용반정량RT-PCR화Western blot 분별검측량조적PCNA、FSHR、StAR mRNA여PCNA、FSHR、StAR、IGF-Ⅰ、p-ERK1/2、p-p38、Cyclin D2화CDK4단백표체수평.결과 실험조E2교대조조현저승고(P＜0.001),P칙현저강저(P＜0.001)；GC중PCNA、StAR화FSHR mRNA표체량교대조조균명현하강(P＜0.05)；동시PCNA、FSHR、StAR、IGF-Ⅰ、p-ERK1/2여p-p38단백표체교대조조야명현하강(P＜0.05).결론 웅격소대란포발육적영향구유쌍중성,고농도웅격소억제GC분비P적작용가능조우억제E2적분비；병영향ERK1/2화p38MAPK신호통로,일방면통과억제Cyclin D2,사정상적세포주기조공수조이억제세포증식,령일방사세포형태화존활솔실조,이부향조공세포정상분화.
