CAJ | 학술논문

目的研究免疫磁珠和荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测胃癌患者外周血癌细胞的应用价值.方法将不同浓度的人胃腺癌细胞系MGC-803细胞加入到健康人血中,经淋巴细胞分离液收集单核细胞后,等分4份.其中1份直接用于提取RNA(方法Ⅰ)、其他分别用阴性磁珠(方法Ⅱ)、阳性磁珠(方法Ⅲ)及联用阴性和阳性磁珠(方法Ⅳ)富集癌细胞.然后,以癌胚抗原(CEA)mRNA作为分子标志物进行荧光定量RT-PCR检测其相对拷贝数;并检测45例胃癌、30例胃溃疡患者和30名健康人外周血CEA mRNA. 结果方法Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ测得的CEA mRNA相对拷贝数与癌细胞数间有良好的相关性(方法Ⅱ和ⅢP<0.05;方法ⅣP<0.01),尤以Ⅳ方法为佳,可检测出每毫升血中含有的1个胃癌细胞.Ⅰ～Ⅳ方法检测胃癌患者阳性率分别为42.22%、53.33%、51.11%和64.44%;方法Ⅳ与方法Ⅰ比较,差异有显著意义(P<0.05).用方法Ⅳ检测30例胃溃疡患者均为阴性,而其他3种方法检出2例阳性;30名健康人中4种方法均未检出扩增产物. 结论免疫磁珠与荧光定量RT-PCR法可提高胃癌患者外周血CEA mRNA的检出率.
목적연구면역자주화형광정량역전록-취합매련반응(RT-PCR)검측위암환자외주혈암세포적응용개치.방법장불동농도적인위선암세포계MGC-803세포가입도건강인혈중,경림파세포분리액수집단핵세포후,등분4빈.기중1빈직접용우제취RNA(방법Ⅰ)、기타분별용음성자주(방법Ⅱ)、양성자주(방법Ⅲ)급련용음성화양성자주(방법Ⅳ)부집암세포.연후,이암배항원(CEA)mRNA작위분자표지물진행형광정량RT-PCR검측기상대고패수;병검측45례위암、30례위궤양환자화30명건강인외주혈CEA mRNA. 결과방법Ⅱ、Ⅲ화Ⅳ측득적CEA mRNA상대고패수여암세포수간유량호적상관성(방법Ⅱ화ⅢP<0.05;방법ⅣP<0.01),우이Ⅳ방법위가,가검측출매호승혈중함유적1개위암세포.Ⅰ～Ⅳ방법검측위암환자양성솔분별위42.22%、53.33%、51.11%화64.44%;방법Ⅳ여방법Ⅰ비교,차이유현저의의(P<0.05).용방법Ⅳ검측30례위궤양환자균위음성,이기타3충방법검출2례양성;30명건강인중4충방법균미검출확증산물. 결론면역자주여형광정량RT-PCR법가제고위암환자외주혈CEA mRNA적검출솔.