中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2003年
8期
534-537
,共4页
陈纯%黄绍良%段连宁%李浩威%温冠媚%魏菁
陳純%黃紹良%段連寧%李浩威%溫冠媚%魏菁
진순%황소량%단련저%리호위%온관미%위정
免疫耐受%CD40%CD40配体%细胞因子
免疫耐受%CD40%CD40配體%細胞因子
면역내수%CD40%CD40배체%세포인자
目的:探讨应用抗CD40L单克隆抗体阻断CD40-CD40L共刺激途径后对T细胞表型及其分泌的细胞因子的影响,为体外阻断该共刺激途径诱导T细胞对异体移植抗原的免疫耐受提供实验依据.方法:供鼠(C57BL/6H-2b)脾T细胞作为反应细胞,受鼠(BALB/CH-2d)脾细胞作为刺激细胞,设单抗组(加抗CD40L单抗)和对照组(不加单抗),初次混合淋巴细胞培养(MLR)7天,在不同时间点采用3H-TdR掺入法检测细胞增殖率,以ELISA法测定培养上清液中IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10等的水平,第5天采用流式细胞仪检测CD4+T和CD8+T细胞上CD25、CD69、CD40L和CD45RA的表达.再次MLR 5天,第1、3、5天采用3H-TdR掺入法测定细胞的增殖情况和ELISA法测定培养上清液中的上述细胞因子的水平.结果:初次和再次MLR结果均显示,单抗组细胞增殖反应率明显低于对照组.初次MLR单抗组中CD4+T和CD8+T细胞比例明显低于对照组(P<0.05);单抗组中CD4+CD25+T、CD4+CD69+T、CD8+CD25+T、 CD4+CD40L+T和CD8+CD69+T细胞比例明显低于对照组(P<0.05),而CD8+CD40L+T和CD4+CD45RA+T细胞的比例与对照组相比无明显差异(P>0.05).初次MLR中单抗组和对照组培养上清中IL-4和IL-10几乎无法测出,而单抗组培养上清中IFN-γ和IL-2的水平均明显低于对照组(P<0.01);再次MLR后培养上清中单抗组IFN-γ、IL-2和IL-4和IL-10的分泌水平明显低于对照组(P<0.05),但处于低水平,仍明显低于对照组.结论:在体外MLR体系中,应用抗CD40L单抗孵育供鼠脾T细胞,可同时作用于CD4+T和CD8+T细胞,使CD40L+,CD25+和CD69+表达下降,引起T细胞早期的活化和成熟障碍,T细胞增殖能力减低,抑制了Th1类细胞因子IFN-γ和IL-2及Th2类细胞因子IL-4和IL-10的分泌水平,可诱导供者T细胞免疫耐受.
目的:探討應用抗CD40L單剋隆抗體阻斷CD40-CD40L共刺激途徑後對T細胞錶型及其分泌的細胞因子的影響,為體外阻斷該共刺激途徑誘導T細胞對異體移植抗原的免疫耐受提供實驗依據.方法:供鼠(C57BL/6H-2b)脾T細胞作為反應細胞,受鼠(BALB/CH-2d)脾細胞作為刺激細胞,設單抗組(加抗CD40L單抗)和對照組(不加單抗),初次混閤淋巴細胞培養(MLR)7天,在不同時間點採用3H-TdR摻入法檢測細胞增殖率,以ELISA法測定培養上清液中IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10等的水平,第5天採用流式細胞儀檢測CD4+T和CD8+T細胞上CD25、CD69、CD40L和CD45RA的錶達.再次MLR 5天,第1、3、5天採用3H-TdR摻入法測定細胞的增殖情況和ELISA法測定培養上清液中的上述細胞因子的水平.結果:初次和再次MLR結果均顯示,單抗組細胞增殖反應率明顯低于對照組.初次MLR單抗組中CD4+T和CD8+T細胞比例明顯低于對照組(P<0.05);單抗組中CD4+CD25+T、CD4+CD69+T、CD8+CD25+T、 CD4+CD40L+T和CD8+CD69+T細胞比例明顯低于對照組(P<0.05),而CD8+CD40L+T和CD4+CD45RA+T細胞的比例與對照組相比無明顯差異(P>0.05).初次MLR中單抗組和對照組培養上清中IL-4和IL-10幾乎無法測齣,而單抗組培養上清中IFN-γ和IL-2的水平均明顯低于對照組(P<0.01);再次MLR後培養上清中單抗組IFN-γ、IL-2和IL-4和IL-10的分泌水平明顯低于對照組(P<0.05),但處于低水平,仍明顯低于對照組.結論:在體外MLR體繫中,應用抗CD40L單抗孵育供鼠脾T細胞,可同時作用于CD4+T和CD8+T細胞,使CD40L+,CD25+和CD69+錶達下降,引起T細胞早期的活化和成熟障礙,T細胞增殖能力減低,抑製瞭Th1類細胞因子IFN-γ和IL-2及Th2類細胞因子IL-4和IL-10的分泌水平,可誘導供者T細胞免疫耐受.
목적:탐토응용항CD40L단극륭항체조단CD40-CD40L공자격도경후대T세포표형급기분비적세포인자적영향,위체외조단해공자격도경유도T세포대이체이식항원적면역내수제공실험의거.방법:공서(C57BL/6H-2b)비T세포작위반응세포,수서(BALB/CH-2d)비세포작위자격세포,설단항조(가항CD40L단항)화대조조(불가단항),초차혼합림파세포배양(MLR)7천,재불동시간점채용3H-TdR참입법검측세포증식솔,이ELISA법측정배양상청액중IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10등적수평,제5천채용류식세포의검측CD4+T화CD8+T세포상CD25、CD69、CD40L화CD45RA적표체.재차MLR 5천,제1、3、5천채용3H-TdR참입법측정세포적증식정황화ELISA법측정배양상청액중적상술세포인자적수평.결과:초차화재차MLR결과균현시,단항조세포증식반응솔명현저우대조조.초차MLR단항조중CD4+T화CD8+T세포비례명현저우대조조(P<0.05);단항조중CD4+CD25+T、CD4+CD69+T、CD8+CD25+T、 CD4+CD40L+T화CD8+CD69+T세포비례명현저우대조조(P<0.05),이CD8+CD40L+T화CD4+CD45RA+T세포적비례여대조조상비무명현차이(P>0.05).초차MLR중단항조화대조조배양상청중IL-4화IL-10궤호무법측출,이단항조배양상청중IFN-γ화IL-2적수평균명현저우대조조(P<0.01);재차MLR후배양상청중단항조IFN-γ、IL-2화IL-4화IL-10적분비수평명현저우대조조(P<0.05),단처우저수평,잉명현저우대조조.결론:재체외MLR체계중,응용항CD40L단항부육공서비T세포,가동시작용우CD4+T화CD8+T세포,사CD40L+,CD25+화CD69+표체하강,인기T세포조기적활화화성숙장애,T세포증식능력감저,억제료Th1류세포인자IFN-γ화IL-2급Th2류세포인자IL-4화IL-10적분비수평,가유도공자T세포면역내수.