CAJ | 학술논문

优化密码沙眼衣原体主要外膜蛋白基因的设计合成与表达
우화밀마사안의원체주요외막단백기인적설계합성여표체
Design and expression of codon optimized chlamydia trachomatis major outer membrane protein gene

万方数据

山东大学学报（医学版）山東大學學報（醫學版） 산동대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY(HEALTH SCIENCES)
2005年 1期 5-8,12 ,共5页

郑燕%赵蔚明%王红%周亚滨%栾怡%齐眉%程轶喆%贾继辉%于修平

정연%조위명%왕홍%주아빈%란이%제미%정질철%가계휘%우수평

衣原体,沙眼%基因,MOMP%基因表达%遗传密码衣原體,沙眼%基因,MOMP%基因錶達%遺傳密碼
의원체,사안%기인,MOMP%기인표체%유전밀마

目的:设计合成优化密码沙眼衣原体主要外膜蛋白(MOMP)基因,克隆构建优化密码MOMP(HuMOMP)基因的真核表达质粒及EGFP-HuMOMP融合基因表达质粒.方法:利用软件分析比较鼠肺炎沙眼衣原体(MoPn)与人类等哺乳动物基因组密码子使用的差异,根据所得数据对MOMP基因进行优化设计与合成.双酶切pUC-HuMOMP质粒,游离HuMOMP片段,定向克隆入pcDNA3的相应位点,构建重组真核表达质粒pcDNA3-HuMOMP;双酶切游离pcDNA3-HuMOMP中的HuMOMP片段,定向克隆入pEGFP-C1的相应位点,构建重组真核表达质粒pEGFP-HuMOMP;pEGFP-HuMOMP质粒体外脂质体转染COS-1细胞,24 h后观察荧光蛋白的表达.结果:合成的HuMOMP基因全长1125 bp,经DNA测序无误.酶切鉴定pcDNA3-HuMOMP及pEGFP-HuMOMP质粒获得预期分子量DNA片段.EGFP-HuMOMP融合基因在COS-1细胞中获得明显表达,表达产物定位于胞浆.结论:设计合成的优化密码HuMOMP基因能够在哺乳动物细胞中成功表达.
목적:설계합성우화밀마사안의원체주요외막단백(MOMP)기인,극륭구건우화밀마MOMP(HuMOMP)기인적진핵표체질립급EGFP-HuMOMP융합기인표체질립.방법:이용연건분석비교서폐염사안의원체(MoPn)여인류등포유동물기인조밀마자사용적차이,근거소득수거대MOMP기인진행우화설계여합성.쌍매절pUC-HuMOMP질립,유리HuMOMP편단,정향극륭입pcDNA3적상응위점,구건중조진핵표체질립pcDNA3-HuMOMP;쌍매절유리pcDNA3-HuMOMP중적HuMOMP편단,정향극륭입pEGFP-C1적상응위점,구건중조진핵표체질립pEGFP-HuMOMP;pEGFP-HuMOMP질립체외지질체전염COS-1세포,24 h후관찰형광단백적표체.결과:합성적HuMOMP기인전장1125 bp,경DNA측서무오.매절감정pcDNA3-HuMOMP급pEGFP-HuMOMP질립획득예기분자량DNA편단.EGFP-HuMOMP융합기인재COS-1세포중획득명현표체,표체산물정위우포장.결론:설계합성적우화밀마HuMOMP기인능구재포유동물세포중성공표체.