CAJ | 학술논문

目的探讨反义肽核酸(PNA)的细胞转染方法及其对体外培养的神经母细胞瘤多药耐药(MDR)相关蛋白P-糖蛋白(P-gp)表达的影响.方法以人MDR-1基因mRNA为靶点设计合成两反义PNA序列,利用PNA-DNA杂交,阳离子脂质体介导转染神经母细胞瘤耐药细胞株SK-N-SH.采用流式细胞术、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和高效液相色谱等方法分别检测反义PNA的转染效率,转染前后细胞P-gp、MDR-1基因mRNA的表达及细胞内阿霉素(ADM)浓度.结果荧光标记的反义PNA转染肿瘤细胞后,细胞平均荧光强度显著增强,呈浓度依赖性.两反义PNA均使SK-N-SH细胞P-gp表达明显降低,MDR-1 mRNA表达轻度降低,细胞内ADM聚集浓度明显增加.结论PNA-DNA杂交阳离子脂质体转染法可有效增加细胞对PNA的摄取,特异序列的反义PNA可在一定程度上阻断神经母细胞瘤MDR相关蛋白P-gp的表达.
목적탐토반의태핵산(PNA)적세포전염방법급기대체외배양적신경모세포류다약내약(MDR)상관단백P-당단백(P-gp)표체적영향.방법이인MDR-1기인mRNA위파점설계합성량반의PNA서렬,이용PNA-DNA잡교,양리자지질체개도전염신경모세포류내약세포주SK-N-SH.채용류식세포술、역전록취합매련반응(RT-PCR)화고효액상색보등방법분별검측반의PNA적전염효솔,전염전후세포P-gp、MDR-1기인mRNA적표체급세포내아매소(ADM)농도.결과형광표기적반의PNA전염종류세포후,세포평균형광강도현저증강,정농도의뢰성.량반의PNA균사SK-N-SH세포P-gp표체명현강저,MDR-1 mRNA표체경도강저,세포내ADM취집농도명현증가.결론PNA-DNA잡교양리자지질체전염법가유효증가세포대PNA적섭취,특이서렬적반의PNA가재일정정도상조단신경모세포류MDR상관단백P-gp적표체.