中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2006年
1期
37-42
,共6页
朱晗玉%陈香美%马润林%张冬芬%任建功
硃晗玉%陳香美%馬潤林%張鼕芬%任建功
주함옥%진향미%마윤림%장동분%임건공
转基因动物模型%基质金属蛋白酶组织抑制物-1%荧光原位杂交%反向PCR
轉基因動物模型%基質金屬蛋白酶組織抑製物-1%熒光原位雜交%反嚮PCR
전기인동물모형%기질금속단백매조직억제물-1%형광원위잡교%반향PCR
为探讨外源基因人基质金属蛋白酶组织抑制物-1(human tissue inhibitor of metalloproteinase-1,hTIMP-1)基因在转基因小鼠家系染色体上的整合和精确定位,应用Southern印迹检测外源基因在染色体上整合的位点及拷贝数.结果表明,外源基因是以单拷贝、单位点形式整合;应用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术检测F4～F20代转基因小鼠中外源基因的整合.结果证明,该家系转基因小鼠自F4代起是纯合子,外源基因整合在17号染色体E区;反向PCR法(Inverse PCR,IPCR)克隆出约3.8kb外源基因整合位点处的侧翼序列.分析表明,外源基因整合在17号染色体E1.3区,ALK(anaplastic lymphoma kinase,ALK)基因第23个内含子区域.结果提示,获得的转基因小鼠为纯系,外源基因hTIMP-1已稳定整合在转基因小鼠染色体上,并能遗传给后代.
為探討外源基因人基質金屬蛋白酶組織抑製物-1(human tissue inhibitor of metalloproteinase-1,hTIMP-1)基因在轉基因小鼠傢繫染色體上的整閤和精確定位,應用Southern印跡檢測外源基因在染色體上整閤的位點及拷貝數.結果錶明,外源基因是以單拷貝、單位點形式整閤;應用熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技術檢測F4～F20代轉基因小鼠中外源基因的整閤.結果證明,該傢繫轉基因小鼠自F4代起是純閤子,外源基因整閤在17號染色體E區;反嚮PCR法(Inverse PCR,IPCR)剋隆齣約3.8kb外源基因整閤位點處的側翼序列.分析錶明,外源基因整閤在17號染色體E1.3區,ALK(anaplastic lymphoma kinase,ALK)基因第23箇內含子區域.結果提示,穫得的轉基因小鼠為純繫,外源基因hTIMP-1已穩定整閤在轉基因小鼠染色體上,併能遺傳給後代.
위탐토외원기인인기질금속단백매조직억제물-1(human tissue inhibitor of metalloproteinase-1,hTIMP-1)기인재전기인소서가계염색체상적정합화정학정위,응용Southern인적검측외원기인재염색체상정합적위점급고패수.결과표명,외원기인시이단고패、단위점형식정합;응용형광원위잡교(fluorescence in situ hybridization,FISH)기술검측F4～F20대전기인소서중외원기인적정합.결과증명,해가계전기인소서자F4대기시순합자,외원기인정합재17호염색체E구;반향PCR법(Inverse PCR,IPCR)극륭출약3.8kb외원기인정합위점처적측익서렬.분석표명,외원기인정합재17호염색체E1.3구,ALK(anaplastic lymphoma kinase,ALK)기인제23개내함자구역.결과제시,획득적전기인소서위순계,외원기인hTIMP-1이은정정합재전기인소서염색체상,병능유전급후대.
