自然科学进展
自然科學進展
자연과학진전
zirankexuejinzhan
2007年
2期
267-271
,共5页
南极土壤微生物%宏基因组文库%抗肿瘤活性%次生代谢产物
南極土壤微生物%宏基因組文庫%抗腫瘤活性%次生代謝產物
남겁토양미생물%굉기인조문고%항종류활성%차생대사산물
微生物代谢产物是药物的重要来源之一,然而采用传统的分离培养筛选的手段仅能对不到1%的微生物资源进行研究开发.通过构建环境样品微生物宏基因组文库能突破人工培养的瓶颈,直接克隆到完整的次级代谢产物合成基因簇,并从中寻找新的药物和活性次生代谢产物.实验直接提取南极中山站排污口土壤样品中微生物总基因组DNA,以黏粒(SuperCos 1)为载体,构建了宏基因组文库,获得了约27 000个克隆子,平均插入片段在35 kb以上,覆盖了至少946 Mb的微生物基因组信息.通过差异性DNA修复试验(DDRT)法对该文库进行筛选,获得13个具有抗肿瘤活性的克隆子,并采用MTT法对其中活性较高的克隆子进行细胞毒活性测定,表明克隆子AE-3对卵巢癌细胞具有明显的生长抑制作用.
微生物代謝產物是藥物的重要來源之一,然而採用傳統的分離培養篩選的手段僅能對不到1%的微生物資源進行研究開髮.通過構建環境樣品微生物宏基因組文庫能突破人工培養的瓶頸,直接剋隆到完整的次級代謝產物閤成基因簇,併從中尋找新的藥物和活性次生代謝產物.實驗直接提取南極中山站排汙口土壤樣品中微生物總基因組DNA,以黏粒(SuperCos 1)為載體,構建瞭宏基因組文庫,穫得瞭約27 000箇剋隆子,平均插入片段在35 kb以上,覆蓋瞭至少946 Mb的微生物基因組信息.通過差異性DNA脩複試驗(DDRT)法對該文庫進行篩選,穫得13箇具有抗腫瘤活性的剋隆子,併採用MTT法對其中活性較高的剋隆子進行細胞毒活性測定,錶明剋隆子AE-3對卵巢癌細胞具有明顯的生長抑製作用.
미생물대사산물시약물적중요래원지일,연이채용전통적분리배양사선적수단부능대불도1%적미생물자원진행연구개발.통과구건배경양품미생물굉기인조문고능돌파인공배양적병경,직접극륭도완정적차급대사산물합성기인족,병종중심조신적약물화활성차생대사산물.실험직접제취남겁중산참배오구토양양품중미생물총기인조DNA,이점립(SuperCos 1)위재체,구건료굉기인조문고,획득료약27 000개극륭자,평균삽입편단재35 kb이상,복개료지소946 Mb적미생물기인조신식.통과차이성DNA수복시험(DDRT)법대해문고진행사선,획득13개구유항종류활성적극륭자,병채용MTT법대기중활성교고적극륭자진행세포독활성측정,표명극륭자AE-3대란소암세포구유명현적생장억제작용.
